[发明专利]一种番茄酱转基因成分的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别涉及一种番茄酱转基因成分的检测方法。

背景技术

番茄是我国重要的蔬菜，番茄酱是鲜番茄浓缩制成的番茄产品，是常用的调味品， 由于番茄产品的转基因技术已成熟，且转基因番茄产品需要严格审批，因此需要对转基因 番茄酱进行监管，转基因成分检测是转基因监管的技术支撑。

现有的转基因成分检测技术主要检测核酸或蛋白质，其中，基于核酸的检测方法 主要流程为：提取待测样品中的核酸，利用PCR(PolymeraseChainReaction，聚合酶链反 应)的方法扩增样品中的转基因成分，利用实时定量、琼脂糖电泳或芯片技术检测转基因成 分是否存在。

在实现本发明的过程中，发明人发现现有技术至少存在以下问题中的一种：

转基因成分多种多样，而现有技术一次只能检测其中一种或少数几种，因此，需要 对可能的多种转基因成份逐一进行检测，才能确定为“非转基因”产品；一般检测的是共转 化的转基因成分，而不是外源基因本身，因此，对于无标记转基因来说，采用现有的检测方 法会失效；检测基本上是定性检测，但定量检测又有其现实需求，例如，相邻田块的转基因 番茄品种的少量花粉被传到了非转基因品种上，在定性检测时，非转基因食品将被误判为 转基因食品。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种番茄酱转基因成分的检测方 法。所述技术方案如下：

本发明实施例提供了一种番茄酱转基因成分的检测方法，所述方法包括：

确定待测样品中需要检测的转基因成分、所述待测样品中的内源标准基因和所述 待测样品的外源标准基因，所述待测样品为通过番茄加工而成的番茄酱；

制备用于扩增所述转基因成分、所述内源标准基因和所述外源标准基因的测试区 域的多重扩增引物；

对所述待测样品进行抽样并混合，得到混合样品；

提取所述混合样品的基因组；

向所述混合样品的基因组中加入所述外源标准基因，得到混合核酸；

利用所述多重扩增引物对所述混合核酸进行扩增，得到扩增产物，利用所述扩增 产物构建高通量测序文库；

对所述高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；

分析所述测序片段组，获得所述待测样品中所述转基因成分的测序片段的数量、 所述内源标准基因的测序片段的数量和所述外源标准基因的测序片段的数量；

根据所述外源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功；

若所述实验成功，则计算所述待测样品种中所述转基因成分的含量；

根据所述转基因成分的含量判断所述待测样品中是否含有转基因成分。

具体地，所述转基因成分为外源功能基因、抗性标记基因、启动子、终止子和外源 插入旁侧序列中的至少一种。

具体地，所述内源标准基因为所述待测样品的基因组中的单拷贝基因。

具体地，所述外源标准基因不存在于所有生物中。

具体地，所述判断实验是否成功的方法为：当所述外源标准基因的测序片段的数 量和所述内源标准基因的测序片段的数量均≥α1时，则实验成功；当所述外源标准基因的 测序片段的数量或所述内源标准基因的测序片段的数量<α1时，则实验失败；其中，α1为判 定阈值。

具体地，所述判定所述待测样品是否含有转基因成分的方法为：当需要检测的任 意一种所述转基因成分的含量≥α2时，判定所述待测样品含有转基因成分；当所有所述转 基因成分的含量<α2时，判定所述待测样品不含有转基因成分；其中，α2为判定阈值。