[发明专利]使用检测剂、探针和抑制剂检测核酸靶标

权利要求书

1.一种用于检测靶核酸的非诊断性方法，其包括：

a)将检测剂并入靶核酸中，其中：

所述并入包括将所述检测剂连接至所述靶核酸，或

所述并入包括使用PCR引物，并且PCR引物包括在3’端的靶标特异性序列和在5’端的通用核酸序列，以及包括荧光团或淬灭团；

b)向所述反应中添加寡核苷酸探针；

c)向所述反应中添加抑制剂，以使所述抑制剂杂交至并入的检测剂；以及

d)如果所述寡核苷酸探针与所述靶核酸杂交，则利用具有链置换能力的聚合酶延伸所述寡核苷酸探针并且从所述检测剂置换所述抑制剂，从而检测作为所述靶核酸存在的指标的所述抑制剂的杂交对所述寡核苷酸探针的干扰,

其中所述抑制剂是与所述检测剂杂交的寡核苷酸，

所述检测剂是并入所述靶核酸起所述抑制剂结合位点的作用的寡核苷酸。

2.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中所述靶核酸是单链的。

3.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了所述靶核酸内的单核苷酸。

4.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了所述靶核酸内的核苷酸的短序列。

5.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了所述整个靶核酸。

6.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了所述靶核酸内的变异。

7.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了所述靶核酸内的突变。

8.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了所述靶核酸内的多态性。

9.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中所述检测剂与荧光团缀合。

10.根据权利要求1或9所述的非诊断性方法，其中与所述检测剂杂交的抑制剂与淬灭团缀合。

11.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中所述检测剂与淬灭团缀合。

12.根据权利要求1或11所述的非诊断性方法，其中与所述检测剂杂交的抑制剂与荧光团缀合。

13.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中所述检测剂与表位缀合。

14.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中与所述检测剂杂交的抑制剂与表位缀合。

15.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中检测了一个以上靶核酸。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的非诊断性方法，其中所述方法在乳液内进行。

17.根据权利要求16所述的非诊断性方法，其中所述乳液处于微流体机制中。

18.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中所述并入包括将所述检测剂连接至所述靶核酸。

19.根据权利要求1所述的非诊断性方法，其中所述并入包括使用PCR引物，并且PCR引物包括在3’端的靶标特异性序列和在5’端的通用核酸序列，以及包括荧光团或淬灭团。