[发明专利]一种B亚群禽白血病抗性相关的分子标记鉴别方法及其试剂盒和应用

权利要求书

1.一种B亚群禽白血病抗性相关的分子标记鉴别方法，其特征在于，通过检测鸡tvb基 因的DNA片段上的第166位SNP位点是否发生突变来鉴别被检测鸡为遗传抗性型还是遗传 易感型；

当所述鸡tvb基因的DNA片段上的第166位碱基为C时，则判断所述鸡为B亚群禽白 血病易感型；当所述鸡tvb基因的DNA片段上的第166位碱基为T时，则判断所述鸡为B 亚群禽白血病抗性型。

2.根据权利要求1所述的B亚群禽白血病抗性相关的分子标记鉴别方法，其特征在于， 所述方法包括如下步骤：

(1)以所述鸡tvb基因的DNA序列为模板，设计引物对所述鸡tvb基因的DNA片段进 行扩增；

(2)对所得扩增产物用限制性内切酶进行酶切，琼脂糖凝胶电泳检测所得酶切产物；

若只有一条509bp的条带，则突变位点处均为C碱基，判断为B亚群禽白血病敏感型；

若有2条分别为343bp和166bp的条带，则突变位点处均为T碱基，判断为B亚群禽白 血病抗性型；

若有3条分别为509bp、343bp和166bp的条带，则突变位点处一条链为C碱基，另一 条链为T碱基，判断为B亚群禽白血病敏感型。

3.根据权利要求2所述的B亚群禽白血病抗性相关的分子标记鉴别方法，其特征在于， 所述步骤(1)中的引物如SEQIDNO：1～2所示：

正向引物：5'-ATGTGGGCAAGGTAAAACTC-3'，

反向引物：5'-GGTGATGATGATCCATAAAGC-3'。

4.根据权利要求2所述的B亚群禽白血病抗性相关的分子标记鉴别方法，其特征在于， 所述步骤(2)中的限制性内切酶为BsaAI酶。

5.权利要求1-4之一所述的B亚群禽白血病抗性相关的分子标记检测方法在分子标记辅 助选择中的应用。

6.一种B亚群禽白血病抗性相关的分子标记鉴别试剂盒，所述试剂盒包含正向引物和 反向引物、PCR反应混合物、TaqDNA聚合酶、双蒸水、缓冲液和限制性内切酶，其特征在于，

所述正向引物和反向引物的序列为：

正向引物：5'-ATGTGGGCAAGGTAAAACTC-3'，

反向引物：5'-GGTGATGATGATCCATAAAGC-3'；

所述限制性内切酶为BsaAI。