[发明专利]利用转录标志物检测动物组织中β2 有效
| 申请号: | 201510919591.7 | 申请日: | 2015-12-11 |
| 公开(公告)号: | CN105368955B | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
| 发明(设计)人: | 杨曙明;赵璐瑶;程永友;侯粲;游新勇;赵杰;张莹 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
| 地址: | 北京市海淀区中关村南*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 利用 转录 标志 检测 动物 组织 base sub | ||
1.检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中β2受体激动剂的方法,包括:
利用荧光定量PCR分别扩增所述待测的离体的动物组织和/或器官中的ADRB2、PRKACB、ADCY3、ATP1A3、ATP2A3、PTH、MYLK、TNF-α、IL1B基因与内参基因,根据x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9、公式1和公式2分别得出y1和y2;
按照如下方法确定所述待测动物组织和/或器官中是否含有β2受体激动剂:如y1≥y2,所述待测动物组织不含β2受体激动剂,如y1<y2,所述待测动物组织含有β2受体激动剂;
所述x1为ADCY3基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x2为ADRB2基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x3为ATP1A3基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x4为ATP2A3基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x5为IL1B基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x6为MYLK基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x7为PRKACB基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x8为PTH基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
所述x9为TNF-α基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值;
公式1:y1=8.682×x1+7.407×x2-10.405×x3+16.787×x4+5.522×x5+6.955×x6-7.0922×x7+10.165×x8+4.047×x9-263.3690;
公式2:y2=6.093×x1+4.302×x2-8.498×x3+14.236×x4+5.065×x5+7.206×x6-5.875×x7+8.845×x8+2.588×x9-173.868。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述待测动物为哺乳动物;
和/或,所述组织为肌肉组织;
和/或,所述β2受体激动剂为莱克多巴胺;
和/或,所述内参基因为GAPDH。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述待测动物为山羊。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:所述利用荧光定量PCR分别扩增所述待测动物组织和/或器官中的ADRB2、PRKACB、ADCY3、ATP1A3、ATP2A3、PTH、MYLK、TNF-α、IL1B基因与所述内参基因的引物对分别为P1、P2、P3、P4、P5、P6、P7、P8、P9和P10;
所述P1为由序列1和序列2所示的单链DNA组成的引物对;
所述P2为由序列3和序列4所示的单链DNA组成的引物对;
所述P3为由序列5和序列6所示的单链DNA组成的引物对;
所述P4为由序列7和序列8所示的单链DNA组成的引物对;
所述P5为由序列9和序列10所示的单链DNA组成的引物对;
所述P6为由序列11和序列12所示的单链DNA组成的引物对;
所述P7为由序列13和序列14所示的单链DNA组成的引物对;
所述P8为由序列15和序列16所示的单链DNA组成的引物对;
所述P9为由序列17和序列18所示的单链DNA组成的引物对;
所述P10为由序列19和序列20所示的单链DNA组成的引物对。
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