[发明专利]利用转录标志物检测动物组织中β2

说明书

本发明公开了利用转录标志物检测动物组织中β₂受体激动剂的方法。本发明所提供的方法包括：利用荧光定量PCR分别扩增待测离体动物组织和/或器官中的ADRB2、PRKACB、ADCY3、ATP1A3、ATP2A3、PTH、MYLK、TNF‑α、IL1B基因与内参基因，根据各基因与内参基因体系中Ct值的差值以及相应公式分别得出y1和y2；按照如下方法确定待测动物组织和/或器官中是否含有或候选含有β₂受体激动剂：如y1≥y2，所述待测动物组织不含或候选不含β₂受体激动剂，如y1＜y2，所述待测动物组织含有或候选含有β₂受体激动剂。本发明可以有效解决β₂受体激动剂的监测难题，有效实现对β₂受体激动剂的监测。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中利用转录标志物检测动物组织中β₂受体激动剂的方法。

背景技术

β受体激动剂包括非选择性的β受体激动剂如异丙肾上腺素及选择性心脏β₁受体激动剂如多巴酚丁胺，选择性β₂受体激动剂如沙丁胺醇、叔丁、喘宁等。β₂受体激动剂其通过兴奋气道平滑肌和肥大细胞膜表面的β₂受体，舒张气道平滑肌、减少肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒及其介质的释放、降低微血管的通透性、增加气道上皮纤毛的摆动等缓解哮喘症状。β₂受体激动剂包括：西马特罗，喷布特罗，妥布特罗，西布特罗，溴不特罗，马布特罗，特布他林，氯丙那林，莱克多巴胺，克伦特罗，沙丁胺醇，班布特罗，利托君，克伦普罗，齐帕特罗，马贲特罗等。

β₂受体激动剂在动物体内的作用机理相同，为：β₂受体激动剂作用于细胞膜上的β₂肾上腺素能受体(β₂AR)受体，刺激受体与鸟苷酸结合蛋白偶联，激活G蛋白与腺苷酸环化酶的偶联，腺苷酸环化酶将三磷酸腺苷转化为3，5-环磷酸腺苷(cAMP)，从而诱发体内的一系列反应。

现行我国标准及相关法律法规虽已明令禁止在动物饲料和饮水中添加β₂受体激动剂，但仍屡禁不止，而目前主流的药物残留分析方法如仪器分析、免疫分析、传感器及芯片分析等均是基于已知药物的检测，新药作为监测的漏洞，继续威胁着消费者的人身安全。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何同时有效实现对β₂受体激动剂家族药物尤其是β₂受体激动剂家族新药的监测。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中β₂受体激动剂的方法。

本发明所提供的检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中β₂受体激动剂的方法，为方法1、方法2、方法3、方法4或方法5：

所述方法1包括：

利用荧光定量PCR分别扩增所述待测的离体的动物组织和/或器官中的ADRB2(β₂肾上腺素受体)基因、PRKACB(cAMP依赖性蛋白激酶)基因、ADCY3(腺苷酸环化酶)基因、ATP1A3(Na⁺/K⁺-ATP酶)基因、ATP2A3(Ca⁺⁺-ATP酶)基因、PTH(甲状旁腺激素)基因、MYLK(肌球蛋白轻链激酶)基因、TNF-α(肿瘤坏死因子α)基因、IL1B(白介素-1β)基因与内参基因，根据x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9、公式1和公式2分别得出y1和y2；

按照如下方法确定所述待测动物组织和/或器官中是否含有或候选含有β₂受体激动剂：如y1≥y2，所述待测动物组织不含或候选不含β₂受体激动剂，如y1＜y2，所述待测动物组织含有或候选含有β₂受体激动剂；