[发明专利]邻苯二甲酸二乙酯人工免疫原及其制备和用途

权利要求书

1.一种邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA，其特征在于，结构式如式(I)所示：

2.一种如权利要求1所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

采用重氮化法将DEP半抗原与蛋白质分子BSA偶联制备人工免疫原DEP-BSA。

3.如权利要求2所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，所述DEP半抗原的制备方法包括如下步骤：

A1、在强酸性介质a存在的条件下，4-硝基邻苯二甲酸与乙醇发生酯化反应，生成4-硝基邻苯二甲酸二乙酯；

A2、在非质子性有机溶剂存在的条件下，所述4-硝基邻苯二甲酸二乙酯和锌粉、强酸b发生还原反应，生成邻苯二甲酸二乙酯半抗原。

4.如权利要求3所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，所述步骤A1中，4-硝基邻苯二甲酸、乙醇、强酸性介质a的摩尔比为1:(5～7):(0.6～0.8)，反应液a的温度为86～90℃，酯化反应时间为8～10小时；所述步骤A2中，4-硝基邻苯二甲酸二乙酯、非质子性有机溶剂a、强酸b和锌粉的摩尔比为1:(550～580):(20～22):(18～20)，反应液b的温度为25～35℃，还原反应时间为10～12小时；所述强酸性介质a和强酸b独立地选自浓盐酸、浓硫酸或浓硝酸中的一种，所述非质子性有机溶剂选自苯或甲苯。

5.如权利要求2所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，所述采用重氮化法将DEP半抗原与蛋白质分子BSA偶联制备人工免疫原DEP-BSA具体包括以下步骤：

B、将DEP半抗原溶于强酸c中，形成DEP半抗原溶液；向DEP半抗原溶液中加入亚硝酸钠溶液，反应，生成重氮盐溶液；

C、将牛血清蛋白BSA溶于硼酸钠缓冲液中，形成牛血清蛋白溶液；

D、向所述重氮盐溶液中加入牛血清蛋白溶液形成反应液，搅拌反应。

6.如权利要求5所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，步骤B中，所述DEP半抗原、强酸c、亚硝酸钠、牛血清蛋白BSA的摩尔比为1:3～4:8～10:0.001～0.01；所述强酸c为浓盐酸、浓硫酸或浓硝酸中的一种。

7.如权利要求5所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，步骤B的反应过程还包括用pH试纸控制反应酸度为2.0-3.0，反应结束后加尿素去除未反应的亚硝酸钠；所述DEP半抗原与尿素的摩尔比为1：300～320。

8.如权利要求5所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，步骤D中，所述搅拌时间为2～4小时。

9.如权利要求5所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的制备方法，其特征在于，所述步骤还包括步骤D的反应结束后，离心分离反应液，取上清液透析，离心分离，得纯化后的邻苯二甲酸二乙酯人工免疫原DEP-BSA。

10.一种如权利要求1所述的邻苯二甲酸二乙酯的人工免疫原DEP-BSA的用途，其特征在于，用于痕量塑化剂邻苯二甲酸二乙酯的检测。