[发明专利]一种初步判断细菌类微生物在土壤中定殖能力的方法有效
申请号: | 201510512469.8 | 申请日: | 2015-08-19 |
公开(公告)号: | CN105039494B | 公开(公告)日: | 2018-09-25 |
发明(设计)人: | 吴翔;唐亚;甘炳成;彭卫红;谢丽源;谭昊;陈影;贾定洪;黄忠乾;谭伟;唐杰;何晓兰;姜邻;唐利民;李小林;周洁 | 申请(专利权)人: | 四川大学;四川省农业科学院土壤肥料研究所 |
主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 610065 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 初步判断 细菌 微生物 土壤 中定殖 能力 方法 | ||
一种初步判断细菌类微生物在土壤中定殖能力的方法,包括以下步骤:(1)抗生素对菌株抑菌圈直径的分级,并统计21种抗生素对各菌株的抑菌圈直径在各级的数量;(2)抗生素敏感值的计算:抗生素敏感值=1×I级范围的数量+2×II级范围的数量+…+N×N级范围的数量;(3)初步判断菌株在土壤中定殖能力:若待测菌株对21种指定抗生素敏感值小于85,即可判断菌株在土壤中具有定殖能力。本发明利用菌株对抗生素的敏感分级方法和敏感值计算方法,从而初步判断菌株在土壤中的定殖能力,并通过盆栽试验进一步验证了该方法具有可行性和可靠性。
技术领域
本发明涉及一种判断细菌类微生物在土壤中定殖能力的方法,具体涉及一种基于计算抗生素敏感值初步判断细菌类微生物在土壤中定殖能力的方法。
背景技术
目前,化学肥料给环境带来的负面影响越来越受到人们重视,而生物类制品因为其环境友好性被认为是其最佳的替代品或补充品。因此,功能微生物在农业领域的研究越来越多,微生物肥料、微生物农药等的研究开发也成为了该领域的热点。在大量的研究工作中筛选获得的各类功能微生物,细菌类占有重要的比例。细菌类微生物不仅具有强大的功能,如促生、抗病、抗旱等,其生长速度快,培养条件要求低也是成为研究重点的原因。
定殖能力对功能微生物的应用潜力具有决定性作用,功能再强大的微生物如果不能在应用中具有良好的定殖能力,其在应用中的可行性就会降低。对于在营养丰富的培养条件下分离、筛选所得的功能微生物,判断它们在复杂的环境中的定殖能力是功能微生物从研发走向应用的必经之路。因此,选择一个简便、准确的方法判断其在应用环境中的生存能力显得尤为重要。
土壤是农业类功能微生物主要的定殖载体。目前,常规的检测微生物在土壤中的定殖能力的方法是采集土壤样品,通过分析其中微生物的数量来判断其定殖能力的大小。这个方法准确,但是操作却很繁 琐、所需时间长,不仅包括采集样品、分离计数和对应菌株的鉴定确认等必经程序,还包括微生物施入土壤的试验设计、场地选择、环境条件分析等其它的配套设施投入和相关数据的分析检测。因此,简便、准确的判断功能微生物的定殖能力的方法,不仅可以减少繁琐的操作程序和功能微生物的研究开支,更能反向指导在研究过程中筛选在应用时可能具有高环境适应潜力的菌株,缩短功能微生物从研发到应用的时间,对促进生物制品在农业的应用推广、推进生态环境良好健康发展具有重要的意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,提供一种基于计算抗生素敏感值初步判断微生物在土壤中定殖能力的方法。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是,一种判断菌株在土壤中定殖能力的方法,包括以下步骤:
(1)根据指定21种抗生素药敏片对待测菌株的抑菌圈直径对其进行分级:直径为0的为I级,0<D≤1为II级,1<D≤2为III级,2<D≤3为IV级,3<D≤4为V级,4<D≤5为VI级,…,并统计该菌株在各个级别的数量;
(2)根据统计结果,计算待测菌株对抗生素的敏感值,计算公式为:抗生素敏感值=1×I级范围的数量+2×II级范围的数量+…+N×N级范围的数量;
(3)初步判断菌株在土壤中定殖能力:若待测菌株对21种指定抗生素敏感值小于85,即可判断待测菌株在土壤中具有定殖能力。
本发明通过抗生素对菌株的抑菌圈直径分级和敏感值计算方法,来判断菌株在土壤中的定殖能力,并通过盆栽试验验证了该方法测定和计算方法的可行性和可靠性。
本发明对应用于土壤的功能微生物的定殖潜力提出了新的评价方法,对农业领域生物肥料、生物农药等在应用时筛选高环境适应能力的菌株具有重要的指导意义。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步加以说明。
实施例1
1、抗生素药敏片在菌株平板上产生抑菌圈直径的分级
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