[发明专利]一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法

说明书

本发明公开了一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法，步骤如下：室温下收集鸡蛋清，按照鸡蛋清与新鲜去离子水体积比为1：2的比例进行稀释，不需调节pH，均匀搅拌后离心；向离心所得上清液中加入分子量介于200～20000的聚乙二醇，均匀搅拌后离心，即可得到含有聚乙二醇的高纯度卵白蛋白溶液；对所得含有聚乙二醇的高纯度卵白蛋白溶液进行超滤处理，可以继续制得不含有聚乙二醇的高纯度卵白蛋白。本发明简便快速，成本低廉，条件温和安全，适用于大规模工业化生产，所得卵白蛋白品质很高，方便后续直接加工为各种食品、保健品及医药用品。

技术领域

本发明涉及生物、医药及食品工业技术领域，更具体涉及一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法。

背景技术

卵白蛋白（又称卵清蛋白）是一种由386个氨基酸残基组成的球状含磷糖蛋白，相对分子质量为45KDa，等电点为4.5。卵白蛋白是一种优质蛋白质，不仅含有人体所必需的8种氨基酸，还含有多种人体必须的金属微量元素，具有较高的营养价值，有利于促进个体生长发育和新陈代谢。同时，卵白蛋白还可以经蛋白酶水解加工处理为低分子肽的混合物，调制为营养丰富、极易被人体吸收利用、增强机体免疫力的卵白蛋白营养口服液。此外，卵白蛋白可以直接与铁（Ⅲ）离子形成稳定的复合物，有望作为生物高分子载体加工制备新型复合补铁剂或食品强化铁，从而避免传统补铁剂通常伴有的恶心、呕吐、腹泻等副作用及对胃肠道造成的损伤。

卵白蛋白占鸡蛋清中总蛋白质量的54%～63%，是鸡蛋清中含量最高的一种蛋白质。目前，用硫酸铵、硫酸钠及氯化钠进行盐析是分离卵白蛋白的常规方法。但是产品中含盐量高，需要多次脱盐才能获得较高纯度的卵白蛋白用于进一步加工。还有报道提出用超滤技术制备卵白蛋白，但是该方法需要贵重设备，分离规模也较有限。

发明内容

本发明的目的是提供一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法。该方法所用工艺简单快捷，所用试剂生物安全性高，条件温和，无需复杂设备，可以克服现有卵白蛋白制备工艺的缺点，根据后续加工的需要制备纯度90%～99%及以上的食品级卵白蛋白。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术措施：

（1）用去离子水按比例稀释鸡蛋清，搅拌均匀，离心去除沉淀，收集上清液A；

（2）向步骤（1）所得的上清液A中加入分子量介于200～20000的聚乙二醇，形成混合液，搅拌均匀，离心去除沉淀，收集上清液B，即为含有聚乙二醇的食品级卵白蛋白溶液，其中卵白蛋白占总蛋白质量百分比的90%～99%；

（3））将步骤（2）所得上清液B超滤，对截留部分进行真空冷冻干燥，得到白色粉末，即为不含有聚乙二醇的食品级卵白蛋白，其中卵白蛋白占总蛋白质量百分比的90%～99%。

步骤（1）中，所述鸡蛋清为在室温下新鲜鸡蛋中收集的鸡蛋清，去离子水为新鲜的去离子水；所述鸡蛋清与去离子水体积比为1：2；此时不需要调节pH，其自身pH在8.2～9.2。

步骤（2）中，所述混合液中聚乙二醇的质量百分浓度为15～30%。

步骤（1）和步骤（2）中，所述离心速度为8000 rpm，离心时间为30min。

步骤（3）中，所述超滤为：以膜截留分子量为30 kDa的超滤膜超滤。

本发明制得的含有聚乙二醇的食品级卵白蛋白溶液，直接用于后续酶解加工制备各种营养口服液或者制备为口服复合补铁剂的用途；

本发明制得的不含有聚乙二醇的食品级卵白蛋白，直接用于加工制备各种不含聚乙二醇的营养粉、营养片、营养口服液或者制备为口服复合补铁剂的用途，也可以用于其它需要不含聚乙二醇的卵白蛋白的用途。

本发明具有以下优点：