[发明专利]一种利用微卫星标记鉴定青虾家系的引物组及方法在审
| 申请号： | 201510084807.2 | 申请日： | 2015-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN104651514A | 公开（公告）日： | 2015-05-27 |
| 发明（设计）人： | 傅洪拓;吕洋;乔慧;张文宜;蒋速飞;熊贻伟;龚永生;金舒博;梁国霞;白洪坤 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 邓唯 |
| 地址： | 214081 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 卫星 标记 鉴定 青虾 家系 引物 方法 | ||
1.一种利用微卫星标记鉴定青虾家系的引物组，其特征在于，包括有用于扩增如下12个微卫星位点的引物对：WXM02、WXM04、WXM05、WXM06、WXM07、WXM13、WXM31、WXM33、WXM38、WXM41、E-WXM33和E-WXM62。
2.根据权利要求1所述的利用微卫星标记鉴定青虾家系的引物组，其特征在于：所述的引物对的序列如下所示：WXM02， SEQ ID NO.1～2、WXM04， SEQ ID NO.3～4、WXM05， SEQ ID NO.5～6、WXM06， SEQ ID NO.7～8、WXM07， SEQ ID NO.9～10、WXM13， SEQ ID NO.11～12、WXM31， SEQ ID NO.13～14、WXM33， SEQ ID NO.15～16、WXM38， SEQ ID NO.17～18、WXM41， SEQ ID NO.19～20、E-WXM33， SEQ ID NO.21～22和E-WXM62， SEQ ID NO.23～24。
3.一种利用微卫星标记鉴定青虾家系的方法，其特征在于，包括如下步骤：第1步、提取青虾样本的DNA；第2步、使用权利要求1或2所述的引物组对青虾样本进行PCR扩增；第3步、对扩增产物进行电泳分析，利用电泳结果对青虾进行亲子鉴定。
4.根据权利要求1所述的利用微卫星标记鉴定青虾家系的方法，其特征在于：上述的PCR扩增中，采用25μL反应体系，组成如下：其中10mmol/LdNTP 1μL，10×buffer 2.5μL，25mmol/L MgC12 2μL，8pmol/μL两侧引物各0.75μL，5U TaqDNA聚合酶0.2μL，50ng/μL的DNA模板2μL，用超纯水补足25μL。
5.根据权利要求1所述的利用微卫星标记鉴定青虾家系的方法，其特征在于：PCR反应条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s，复性30s，72℃45s，30个循环；最后72℃延伸7min；4℃保存。
6.根据权利要求1所述的利用微卫星标记鉴定青虾家系的方法，其特征在于：上述的第3步中，用10%的非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳检测、EB染色10～15min，凝胶成像系统成像拍照。
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