[发明专利]具有神经保护作用的肽及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有神经保护作用的肽，尤其涉及一种具有改善ADDLs介导的神经毒性的肽，该肽可以用于制备防治阿尔茨海默病，属于生物医学技术领域。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)，亦称老年痴呆症(senile dementia)，是一种以进行性智能衰退为特征的中枢神经系统退行性疾病，其确切的发病机制尚不明确。近年来越来越多的研究表明，可溶性β淀粉样蛋白(amyloidβ-peptide,Aβ)寡聚物，也称Aβ来源的可扩散性配体(Aβ-derived diffusible ligands,ADDLs)是AD病因的关键分子。目前，ADDLs已经成为治疗AD的热门靶点，靶向ADDLs治疗不但可以改善AD的早期症状，而且还可能会延缓AD的进程。以ADDLs为靶点研究改善认知功能障碍的治疗策略会促进抗AD药物的设计和开发，对于预防和早期治疗AD具有重要的临床意义和社会价值。

ADDLs攻击神经细胞时，它们并不是各处都存在，而是选择性地结合与学习和记忆相关的神经细胞受体。最近的研究发现ADDLs可以和海马神经元表面的受体酪氨酸激酶EphB2结合，这种结合导致EphB2的降解，进而削弱N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)正常功能的发挥。但内源的ADDLs和EphB2在AD模型小鼠的海马组织是否发生原位结合还有待研究。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，本发明通过大量实验研究，筛选出ADDLs和EphB2的相互作用位点，优选出干扰二者相互作用的新型肽，本发明优选的肽可以结合ADDLs，从而可阻止ADDLs和EphB2的结合，阻止EphB2的降解，进而维持NMDAR在突触膜上的表达，具有很好的改善ADDLs的神经毒性，改善突触可塑性及认知功能，从而具有很好的神经保护作用，可用于制备防治阿尔茨海默病的药物。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有神经保护作用的肽，该肽具有下述的氨基酸序列：

Val-Phe-Gln-Val-Arg-Ala-Arg-Thr-Val-Ala(缬氨酸-苯丙氨酸-谷氨酰胺-缬氨酸-精氨酸-丙氨酸-精氨酸-苏氨酸-缬氨酸-丙氨酸)。本发明简称该肽为pep63，其氨基酸序列如序列1。

一种具有神经保护作用的肽，该肽具有下述的氨基酸序列：

Asn-Gly-Val-Thr-Asp-Gln-Ser-Pro--Phe-Ser(天冬酰胺-甘氨酸-缬氨酸-苏氨酸-天冬氨酸-谷氨酰胺-丝氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-丝氨酸)。本发明简称该肽为pep32，其氨基酸序列如序列2。

本发明所述的以上二种具有神经保护作用的肽在制备防治阿尔茨海默病药物中的应用。

本发明提供具有神经保护作用的肽，其中Pep63(氨基酸序列V F Q V R A R T V A)和Pep32(氨基酸序列N G V T D Q S P F S)，可以竞争性地结合ADDLs，阻止EphB2的降解，进而维持NMDAR在突触膜上的表达，改善ADDLs的神经毒性，最终改善突触可塑性及认知功能，从而具有神经保护作用和治疗阿尔茨海默病的功效。

本发明提供的神经保护肽pep63和pep32可以用于制备改善ADDLs的神经毒性的制剂。

本发明通过免疫共沉淀实验，证明内源的ADDLs和EphB2在AD模型小鼠的海马组织中发生了原位结合。

本发明首先采用多肽阵列检测的方法，详细研究了ADDLs和EphB2的相互作用位点，根据ADDLs和EphB2的相互作用位点设计了4种不同的干扰小肽。同时，本发明对设计的4种小肽进行了筛选。研究证实上述的肽pep32和pep63能够竞争性与ADDLs结合，从而阻止ADDLs和EphB2的结合，阻止EphB2的降解，进而维持NMDAR在突触膜上的表达，改善ADDLs的神经毒性，具有很好的神经保护作用。

本发明的具有神经保护作用的肽在制备防治阿尔茨海默病药物中的应用，根据中国药典方法及其相关常用方法，把本发明具有神经保护作用的肽和药学上可接受的载体制备成丸剂、胶囊剂、片剂或注射剂制剂。

有益效果：本发明和现有技术相比具有以下优点：