[发明专利]组合使用并治疗癌症患者亚群的肽和肽模拟物

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年6月24日提交的美国临时申请号61/838,777的优先权，该申请通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及包括单独和与直接或间接损害核酸(例如，DNA)的治疗组合而具有抗细胞增殖活性的肽和肽模拟物的化合物。本发明化合物因此可用于抑制细胞增殖，并且由此可用于治疗细胞增殖疾患，包括癌症。

前言

细胞周期包括S期(DNA复制)、M期(有丝分裂)和S期与M期之间的两个间期(G1和G2期)。细胞周期中的检查点(checkpoint)可确保准确进展，如监控DNA完整性的状态、DNA复制、细胞大小情况及周围环境(Maller,J.L.Curr.Opin.CellBiol.,3：26(1991))。对多细胞生物而言，维持基因组完整性尤为重要，因而存在多个监控基因组状态的检查点。这些检查点当中，G1和G2检查点分别在DNA复制和有丝分裂之前存在。进入S期之前纠正DNA损伤是至关紧要的，因为一旦受损的DNA得到复制，常常引发突变(Hartwell,L.Cell,71：543(1992))。经由G1和G2检查点而未修复过度DNA损伤的进展可导致细胞凋亡和/或毁灭。

大部分癌细胞在G1检查点相关蛋白例如p53、Rb、MDM-2、p16^INK4和p19^ARF中存在异常(Levine,A.J.Cell,88：323(1997))。或者，突变可引起致癌基因产物例如Ras、MDM-2和细胞周期蛋白D的过度表达和/或过度活化，从而降低G1检查点的严格性。除这些突变外，生长因子的过度表达可导致过度的生长因子信号传导，这可降低G1检查点的严格性。与丧失和获得功能的突变一起，生长因子受体或下游信号转导分子的连续活化可通过跨越G1检查点而引起细胞转化。被取消的G1检查点促成了较高的突变率以及在癌细胞中可观测到的许多突变。结果是大部分癌细胞依赖于G2检查点以对抗过度DNA损伤而得以存活(O’Connor和Fan,Prog.CellCycleRes.,2:165(1996))。

DNA损伤后，促使细胞周期G2期停滞的机制被认为在从酵母到人的物种中是保守的。存在受损DNA的情况下，由于Cdc2激酶上的苏氨酸-14和酪氨酸-15残基的抑制性磷酸化作用，或细胞周期蛋白B的蛋白水平降低的缘故，Cdc2/细胞周期蛋白B激酶保持无活性状态。有丝分裂开始时，双重磷酸酶Cdc25移除了这些抑制性磷酸盐，并从而活化了Cdc2/细胞周期蛋白B激酶。Cdc2/细胞周期蛋白B的活化相当于M期的开始。

在裂殖酵母中，蛋白激酶Chk1对响应于受损DNA的细胞周期停滞而言是必不可少的。Chk1激酶作用于若干rad基因产物的下游，并通过DNA损伤后的磷酸化作用得到修饰。已知芽殖酵母的激酶Rad53和裂殖酵母的Cds1均从未复制的DNA传导信号。在Chk1与Cdsl之间似乎存在某些冗余，因为Chk1与Cdsl二者的清除在破坏由受损DNA引起的G2停滞方面最有效。有趣的是，Chk1和Cds1均可使Cdc25磷酸化，并促使Rad24与Cdc25结合，从而将Cdc25隔离到细胞溶质中并阻止Cdc2/细胞周期蛋白B的活化。因此Cdc25似乎是这些激酶的共同靶标，意味着该分子在G2检查点中是不可缺少的因子。

在人中，裂殖酵母Chk1的人同源物hChk1，与芽殖酵母Rad53和裂殖酵母Cds1的人同源物Chk2/HuCdsl响应于DNA损伤，均于关键调节位点丝氨酸-216处将Cdc25C磷酸化。该磷酸化为裂殖酵母的Rad24和Rad25的人同源物，即小酸性蛋白14-3-3s创建了一个结合位点。Cdc25C上的丝氨酸-216被丙氨酸取代而破坏了人细胞中细胞周期G2期停滞的事实清楚地说明该磷酸化的调节作用。然而，G2检查点的机制尚未被完全了解。

肿瘤微环境在癌细胞生长、侵染、转移和抗肿瘤免疫性的预防或促进方面也发挥作用，其影响患者预后。已经表明，曾经预期对抗癌细胞的巨噬细胞在肿瘤发展中发挥抑制和促进两种作用。称为M1的具有经典抗肿瘤表型的巨噬细胞是促炎性的，而具有促肿瘤和抗炎类型的那些巨噬细胞称为M2，其具有属于该类别的至少三个主要的亚型(Martinez和Gordon,F1000PrimeReports6：13(2014))。