[发明专利]一种用于检测大肠菌群的试剂盒及应用在审
| 申请号： | 201410660228.3 | 申请日： | 2014-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN104404144A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 胡双芳;肖性龙;李蓉;余以刚;吴晖 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学;中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 苏运贞;裘晖 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 大肠菌 试剂盒 应用 | ||
1.一种用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：包括引物序列和探针序列；其中：引物序列由上游引物F1130a、上游引物F1130b和下游引物R1264组成；探针序列为探针Pb1156A；
所述的上游引物F1130a的序列为如下所述的任一条序列：核心序列A；或以核心序列A为中心，向5’和3’端分别或同时延伸1～10个核苷酸得到的序列；
核心序列A：5’-TCCTGCTGATGAAGCAGAACAA-3’；
所述的上游引物F1130b的序列为如下所述的任一条序列：核心序列B；或以核心序列B为中心，向5’和3’端分别或同时延伸1～10个核苷酸得到的序列；
核心序列B：5’-ATATCGAACTCATGAAGCAGCATAA-3’；
所述的下游引物R1264的序列为如下所述的任一条序列：核心序列C；或以核心序列C为中心，分别或同时向5’端延伸1～10个核苷酸以及向3’端延伸1～2个核苷酸得到的序列；
核心序列C：5’-CCATGCCGTGGGTTTCAATAT-3’；
所述的探针Pb1156A的序列为如下所示的核心序列D；或以核心序列D为中心，分别或同时向5’端延伸1～2个核苷酸以及向3’端延伸1～10个核苷酸得到的序列；
核心序列D：5’-R-AACGCCGTGCGCTGYTCGCA-Q-3’，R为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。
2.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的上游引物F1130a的序列为核心序列A、向核心序列A的5’端延伸10个核苷酸得到的序列或向核心序列A的3’端延伸10个核苷酸得到的序列。
3.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的上游引物F1130b的序列为核心序列B、向核心序列B的5’端延伸10个核苷酸得到的序列或向核心序列B的3’端延伸10个核苷酸得到的序列。
4.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的下游引物R1264的序列为核心序列C、向核心序列C的5’端延伸10个核苷酸得到的序列或向核心序列C的3’端延伸2个核苷酸得到的序列。
5.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的探针Pb1156A的序列为核心序列D、向核心序列D的5’端延伸2个核苷酸得到的序列或向核心序列D的3’端延伸10个核苷酸得到的序列。
6.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的荧光报告基团为FAM、HEX或TET。
7.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的荧光淬灭基团为TAMRA或BHQ1。
8.根据权利要求1所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：所述的核心序列D为5'-HEX-AACGCCGTGCGCTGYTCGCA-BHQ1-3'。
9.权利要求1～8任一项所述的用于检测大肠菌群的试剂盒，其特征在于：还包含用于荧光定量PCR的酶和试剂。
10.权利要求1～9任一项所述用于检测大肠菌群的试剂盒在食品领域中进行应用。
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