[发明专利]血红铆钉菇多糖在制备抗酪氨酸酶抑制剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及血红铆钉菇多糖的新用途，特别涉及血红铆钉菇多糖在制备抗酪氨酸酶抑制剂中的应用。还涉及血红铆钉菇多糖的提取方法。

背景技术

大型真菌(Macrofungi或Macromycetes)，是指那些能够形成肉眼可见的大型子实体的真菌，它们多数属于真菌界的担子菌门(Basidiomycota)，其余的属于子囊菌门(Ascomycota)。有性孢子产生在外部微小棒状结构的大型真菌隶属于担子菌门；有性孢子产生在微小囊状结构的大型真菌隶属于子囊菌门。

大型真菌被认为是重要的天然资源，根据用途可以将大型真菌分为食用菌和药用菌。大型真菌富含多糖、氨基酸、维生素等营养物质，被认为是低脂肪、高营养的健康食品。一些大型真菌被发现了具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗糖尿病和降血脂的作用，这些活性和大型真菌产生的多糖、不饱和脂肪酸、蛋白酶等活性成分相关。大型真菌除了食用与药用外，还被应用在其它很多方面。例如，甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的活性母核，最初就是在大型真菌中分离出来的。

大型真菌根据它的营养方式可以分为，寄生型大型真菌、腐生型大型真菌。主要从活体生物，获取营养的大型真菌，被称为寄生型大型真菌；从非活体生物中，获取营养的为腐生真菌。寄生菌中一部分真菌可以和寄主植物形成共生菌根，被称为外生菌根型大型真菌。相比较而言，腐生菌较易人工培养，然后是寄生菌，菌根菌较难人工培养。

我们国家幅员辽阔，被认为是生物多样性最丰富的国家之一，被记载的大型真菌有3800种以上，其中伞菌类(如，蜜环菌)约有1600种，多孔菌类(如，云芝菌)约1300种，腹菌(如，马勃菌)约300种，胶质类(如，木耳菌)约100种。自古以来，中国人就有利用大型真菌的传统。食用菌方面：早在6000至7000年前我们祖先就开始采食蘑菇了，文字记载的采食蘑菇的历史可以追溯至2000多年前，中国已知的大型真菌近900种，其中有很多大型真菌被人工驯化培养，中国也是全世界食用菌产量最高的国家，超过总量50％的食用菌产自中国。由于东西方饮食习惯的差距很大，在许多国家认为是有毒的大型真菌，但在中国经过加工后就可以被食用。自古以来，我国就有利用大型真菌入药的习俗，例如灵芝、冬虫夏草这些著名的中药都属于大型真菌。

本发明的目的是通过分子鉴定技术与形态学鉴定技术相结合的方法鉴定收集到的14种东北常见的野生大型真菌，调查这14种大型真菌的多种生物活性。通过对14种野生大型真菌的研究，为进一步开发利用的这些真菌提供理论依据，使一些闲置的、可再生的资源得到合理开发利用。

发明内容

本发明发明人在中国东北小兴安岭，收集到14种常见的野生大型真菌。首先对这14种大型真菌进行鉴定，并且对它们的多糖含量、抗氧化、抗酪氨酸酶等活性进行研究。通过形态学和分子生物学两种方法鉴定大型真菌，发现它们分别属于6个科：其中多孔科4种、口蘑科3种、红菇科3种、环柄菇科3种、马勃科1种与铆钉菇科1种。对这14种大型真菌的粗多糖进行了提取，然后对粗多糖提取物进行了沉淀、脱脂与透析来进行纯化，获得了水溶性的纯化后的多糖。

接下来，本发明通过三种方法测试了14种大型真菌多糖的抗氧化活性，对于清除自由基ABTS^·+活性方面大型真菌的纯化后多糖PPS的活性为16.9至535.8μmol/gTEAC，在铁离子还原力方面纯化后多糖PPS的活性为0.23至5.94mmol Fe/g，在亚铁离子螯合力方面纯化后多糖PPS的活性为0.70至484.61μmol Fe²⁺/g发现有6种大型真菌多糖的抗氧化活性较强，而且这6种大型真菌都可以食用。这6种真菌分别是龟裂马勃、乳突环柄菇、奥氏蜜环菌、高大环柄菇、紫丁香蘑和黄小蜜环菌。最强的为龟裂马勃菌(Handkea utriformis)，它的清除自由基活性为535.8μmol/gTEAC，还原力活性为5.94mmol Fe/g，金属螯合力为274.8μmol Fe²⁺/g，都是位于14种大型真菌的前两位的。