[发明专利]一种基于核酸适配体探针荧光传感分析检测待测样本中的靶标物质的方法有效
| 申请号： | 201410360025.2 | 申请日： | 2014-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN104178568A | 公开（公告）日： | 2014-12-03 |
| 发明（设计）人： | 周小红;向宇;王若瑜;施汉昌 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 核酸 适配体 探针 荧光 传感 分析 检测 样本 中的 靶标 物质 方法 | ||
1.一种检测待测样本中是否含有靶标物质的方法，包括如下步骤：
(1)将功能磁珠与所述待测样本共孵育；所述功能磁珠是将(a)和(b)杂交得到的；所述(a)为表面修饰有特异识别靶标物质的核酸适配体的磁珠；所述(b)为连接有链霉亲和素和标记物的探针；所述探针为与所述核酸适配体部分互补的单链核酸分子；
(2)完成步骤(1)后，进行磁分离，收集上清液；
(3)在与标记物相应的的激发波长激发下，采用表面修饰有脱硫生物素或生物素的固相芯片检测步骤(2)得到的上清液，根据信号值判断待测样本中是否含有靶标物质。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述表面修饰有脱硫生物素的固相芯片的制备方法包括如下步骤：
(1)取固相芯片，使其表面羟基化；
(2)完成步骤(1)后，取固相芯片，使其表面修饰APTS；
(3)完成步骤(2)后，取固相芯片，使其表面修饰脱硫生物素。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述固相芯片为光纤。
4.如权利要求1至3中任一所述的方法，其特征在于：所述靶标物质为赭曲霉素A。
5.如权利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述磁珠为羧基磁珠。
6.如权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：所述核酸适配体如序列表的序列1所示，所述探针如序列表的序列2所示。
7.一种检测待测样本中是否含有靶标物质的试剂盒，包括功能磁珠和表面修饰有脱硫生物素或生物素的固相芯片；所述功能磁珠是将(a)和(b)杂交得到的；所述(a)为表面修饰有特异识别靶标物质的核酸适配体的磁珠；所述(b)为连接有链霉亲和素和标记物的探针；所述探针为与所述核酸适配体部分互补的单链核酸分子。
8.一种检测待测样本中是否含有靶标物质的试剂盒，包括“表面修饰有脱硫生物素或生物素的固相芯片”、“表面修饰有特异识别靶标物质的核酸适配体的磁珠”和“连接有链霉亲和素和标记物的探针”；所述探针为与所述核酸适配体部分互补的单链核酸分子。
9.如权利要求7或8所述的试剂盒，其特征在于：所述固相芯片为光纤；所述磁珠为羧基磁珠。
10.如权利要求7至9中任一所述的方法，其特征在于：所述靶标物质为赭曲霉素A；所述核酸适配体如序列表的序列1所示，所述探针如序列表的序列2所示。
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