[发明专利]利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法

权利要求书

1.利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法，包括在有氧及避光条件下，含有碳源、氮源及无机组分的无菌发酵培养基中培养血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)CGMCC No.2932，其特征在于还包括如下步骤：

发酵培养基采用如下质量份数的组分组成：

玉米粉20-40，麸皮粉3-10，酒石酸铵1-5,磷酸二氢钾1-1.5，七水合硫酸镁0.2-0.2，琥珀酸钠0.8-1.0,五水合硫酸铜0.15-0.25，六水合氯化钾0.01-0.05,七水合硫酸锌0.01-0.04,表面活性剂0.1-0.5,消泡剂0.01-0.05，水1000，pH自然；

发酵的条件是：

接种量为8％-10％，0-3天：通风比为1:0.3-0.4vvm，温度30℃-32℃；4-6天：通风比为1:0.7-0.9vvm，温度30℃-32℃；7-9天：通风比为1:1.0-1.4vvm，温度30℃-32℃；10-11天：通风比为1:1.0-1.2vvm，温度30℃-32℃；第三天流加甲醇诱导剂8-15ul；在第3天、第5天、第7天、第9天每天流加补水500-1000ml，第5-8天每天流加浓度为5mg/l硫酸铜溶液1-3ml，发酵周期为10-12天。

2.根据权利要求1所述的利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法，其特征在于所述的表面活性剂选用吐温-80,消泡剂选用泡敌。

3.根据权利要求1所述的利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法，其特征在于还包括如下工艺步骤：将血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)CGMCC No.2932扩大培养后制成种子液；将种子液接种至无菌发酵培养基进行培养。

4.根据权利要求3所述的利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法，其特征在于所述的扩大培养是将斜面菌种制成克氏瓶种子。

5.根据权利要求4所述的利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法，其特征在于所述的扩大培养中克氏瓶培养基采用如下方法制备：将麦芽汁培养基稀释至12柏林，加入琼脂15克。

6.根据权利要求1或5中任一项所述的利用血红密孔菌制备含有漆酶发酵液的方法，其特征在于所述的扩大培养方法如下：将斜面菌种室温活化2-4小时后接种至灭菌后的克氏瓶培养基，在28℃-32℃条件在培养3-4天制成克氏瓶种子。