[发明专利]一种制备木蝴蝶苷A的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种制备木蝴蝶苷A的方法。

背景技术

黄酮类化合物广泛分布于蔬菜、水果和草本药材中，并具有极高的药用价值，如可抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等，开发意义重大。除了一些常见的黄酮醇苷，如槲皮素苷和山柰酚甙已被证明具有良好的生物活性，近年来，黄酮苷也得到了广泛的研究。例如，一些黄酮苷具有较好的抗肿瘤、消炎、抗疟原虫或抗锥虫等作用。

从自然植物中提取黄酮苷是其主要来源，但也使其生产成本较高，成为限制其进一步应用的一大障碍。为了解决这个问题，蛋白质工程、代谢工程和合成生物学已被应用于提高黄酮苷的有效生产率。尽管酶工程、基因工程可以提高产量，但是在实际应用中存在种种困难，例如周期长、效率低，副反应多、分离纯化难等。

木蝴蝶（Oroxylum indicum）属紫葳科，始载于《滇南本草》，原名千张纸，是一种常用中药。其味苦、甘，性凉，入肺、肝、胃经，有清肺、利咽、止咳、舒肝、和胃等功效，主治咽痛喉痹、声音嘶哑、咳嗽、肝胃气痛、疮疡久溃不敛、浸淫疮等。木蝴蝶中的化学成分主要为黄酮类化合物，如黄芩素（Baicalein），白杨素（Chrysin），木蝴蝶苷A（Oroxin A），木蝴蝶苷B（Oroxin B），木蝴蝶定（Oroxindin），千层纸苷（Tetuin），黄芩苷（Baicalin）等。近年来，木蝴蝶苷的药用价值受到了越来越多的关注，其中OroxinA，Oroxin B和Oroxylin A 7-0-glucuronide具有抗氧化、抗炎、免疫调节等功能以及抗金黄色葡萄球菌感染等生理活性。但是由于从木蝴蝶中分离纯化Oroxin A，Oroxin B较困难，因此其价格相当昂贵，例如1g纯度为97%的Oroxin A需要$1500，严重影响了该类化合物在体内体外药效评价研究等领域的应用。

目前，国内外科研人员已采用多种方法来获得Oroxin系列化合物，如Liu等人采用高速逆流色谱法从天然的木蝴蝶中分离纯化得到纯度为99.1%的Oroxin A，但是这种方法成本很高，不适用于大量提纯(Journal of separation science 2010, 33, 1058-1063)。Sohng等人通过构建具有尿苷二磷酸葡萄糖（UDP-葡萄糖）途径和糖基转移酶的大肠杆菌菌株，开发了一种可以从黄酮苷元——黄芩素生物转化为黄芩素-7-O-葡萄糖苷（Oroxin A）的生物合成方法，但是该方法容易产生非常复杂的副产物，给分离纯化带来了诸多困难(Process Biochemistry 2013, 48, 1744-1748)。因此，是否能通过化学合成从根本上解决这些问题，开发一种简洁的合成路线来大量合成Oroxin A，成为当前亟待解决的问题。

根据黄酮苷的生源途径，我们发现黄芩苷（Baicalin）和Oroxin A几乎具有相同的结构，Baicalin是黄芩素-7-O-葡萄糖醛酸苷，而Oroxin A是黄芩素-7-O-葡萄糖苷。黄芩苷是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，是黄芩的主要有效成分，含量占10%以上，因此，其来源非常丰富，价格便宜，以baicalin作为起始原料用来合成Oroxin A，可有效解决Oroxin A原料不足的难题，同时也可为其他同类化合物的合成提供新的解决思路和方案。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备木蝴蝶苷A的方法，针对现有各种方法制备和提取木蝴蝶苷A较困难，例如收率低，提取成本高等缺点，我们进行了本发明。本发明的目的在于提供一种半合成制备木蝴蝶苷A的方法，其特征在于极大地提高了收率，降低了生产成本。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种制备木蝴蝶苷A的方法，是以黄岑苷为起始原料，经一锅两步法获得所述木蝴蝶苷A。

包括以下步骤：

1）将黄岑苷于有机醇中溶解，0℃下加入无机酸作为催化剂，混匀后加热回流反应2-4小时，溶液颜色开始变黄后点TLC板确定反应程度，待确定反应结束后将得到的黄色液体冷却至室温；

2）0℃下，在步骤1）得到的黄色液体中分批加入还原试剂，再置于室温下反应1-4小时；

3）步骤2）反应结束后加入乙酸乙酯或丙酮，继续反应10-60分钟，再将反应液旋干，加入乙酸乙酯和体积分数为10%的醋酸水溶液，搅拌后得到大量黄色固体，抽滤得到粗产物木蝴蝶苷A；

4）将粗产物用有机溶剂进行重结晶后，抽滤得到高纯度的木蝴蝶苷A。