[发明专利]鉴定大豆百粒重高低的分子标记及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种鉴定大豆百粒重高低的分子标记及其应用。

背景技术

大豆(Glycinemax)是集粮油、饲料和工业用途于一体的重要作物，为人类提供了65％的食用植物蛋白质和31％的食用油。百粒重是大豆重要产量构成因素，对产量有较大直接作用。由于百粒重是复杂的数量性状，易受遗传背景和环境条件影响，准确预测大豆百粒重的高低对筛选高产大豆品种进行大豆育种具有重要意义。

分子标记是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接的反映。与其他几种遗传标记——形态学标记、生物化学标记、细胞学标记相比，DNA分子标记具有的优越性有：大多数分子标记为共显性，对隐性的性状的选择十分便利；基因组变异极其丰富，分子标记的数量几乎是无限的；在生物发育的不同阶段，不同组织的DNA都可用于标记分析；分子标记揭示来自DNA的变异；表现为中性，不影响目标性状的表达，与不良性状无连锁；检测手段简单、迅速。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定大豆百粒重高低的方法。

本发明提供的方法，包括用Barcsoyssr_13_890引物对PCR扩增待测大豆的基因组DNA，检测PCR产物，若所述PCR扩增的产物为DNA片段A和DNA片段B，则所述待测大豆为百粒重高的大豆或候选为百粒重高的大豆；若所述PCR扩增的产物为所述DNA片段A或B，则所述待测大豆为百粒重低的大豆或候选为百粒重低的大豆；

所述Barcsoyssr_13_890引物对由序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对，

所述DNA片段A为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增栽培大豆品种冀豆12号的基因组DNA得到的PCR产物；

所述DNA片段B为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增野生大豆ZYD2738的基因组DNA得到的PCR产物。

上述方法中，检测PCR产物的方法为电泳或测序。

在本发明的实施例中，若PCR产物为DNA片段A和DNA片段B，则该PCR产物为杂合带型(冀豆12号和野生大豆ZYD2738杂交并繁衍至F₈代的世代的带型)；若PCR产物为DNA片段A或DNA片段B，则该PCR产物为亲本带型(冀豆12号或野生大豆ZYD2738的带型)；DNA片段A的大小为120-125bp，具体为125bp,DNA片段B的大小为135-140bp，具体为135bp。

上述方法中，所述百粒重高是指所述待测大豆的百粒重为10—13g；

所述百粒重低是指所述待测大豆的百粒重为5—8g。

在本发明的实施例中，所述百粒重具体为待测大豆籽粒成熟后含水量为12％时的百粒重。

上述方法中，所述待测大豆为大豆品种冀豆12号、野生大豆ZYD2738或由所述冀豆12号和野生大豆ZYD2738衍生的品种或品系。

上述方法中，所述由冀豆12号和野生大豆ZYD2738衍生的品种或品系为将所述冀豆12号和野生大豆ZYD2738杂交并繁衍至F₂代以上的世代。在本发明的实施例中，具体为F₈代。

本发明的另一个目的是提供一种用于鉴定或辅助鉴定大豆百粒重高低的DNA片段。

本发明提供的DNA片段如下1)或2)的DNA片段：

1)DNA片段A和DNA片段B；

2)DNA片段A或DNA片段B；

所述DNA片段A为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增栽培大豆品种冀豆12号的基因组DNA得到的PCR产物；

所述DNA片段B为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增野生大豆ZYD2738的基因组DNA得到的PCR产物；

所述待测大豆为大豆品种冀豆12号、野生大豆ZYD2738或由所述冀豆12号和野生大豆ZYD2738衍生的品种或品系。

上述DNA片段中，所述百粒重高是指所述待测大豆的百粒重为10—13g；

所述百粒重低是指所述待测大豆的百粒重为5—8g；

所述DNA片段A和所述DNA片段B是将所述PCR扩增的产物在5—7％的聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离得到的。