[发明专利]普通小麦麦谷蛋白亚基Bx13基因的分子鉴定方法及专用引物

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及普通小麦麦谷蛋白亚基Bx13基因的分子鉴定方法及专用引物。

背景技术

小麦麦谷蛋白的含量决定了小麦的面团强度和面筋弹性，影响着小麦的加工品质(Figueroa et al.2009)。研究表明，高分子量麦谷蛋白的含量在面包流变学特性方面的影响比醇溶蛋白和低分子量麦谷蛋白更为明显。小麦高低分子量麦谷蛋白亚基通过双硫键形成麦谷蛋白，其含量与小麦品质密切相关，高分子量麦谷蛋白亚基占小麦胚乳蛋白含量的12%，含有丰富的谷氨酰胺重复序列，大量的氢键对小麦良好的烘焙品质有着决定性影响(Shewry et al.1989)，直接决定面包综合品质，其等位变异可以解释欧洲小麦品种在面包烘焙品质方面变化的45%-70%(Branlard and Dardevet 1985;Payne et al.1988)。

由于高分子量麦谷蛋白在小麦加工品质方面的卓越贡献，其优质的亚基被广泛研究应用(Forde et al.1985;Sugiyama et al.1985;Thompson et al.1985;Halford et al.1987;Anderson and Greene1989;Reddy and Appels1993;De Bustos et al.2001)。研究表明，高分子量麦谷蛋白亚基与小麦烘焙品质关系密切(Payne et al.1979Mengand Cai2008;Pang et al.2009)。在Glu-1位点上，亚基对小麦加工品质具有上位效应(Rousset et al.1992;Luo et al.2001;Zhang et al.2009)。

在位点内部，Bx13亚基在Zeleny沉降值、面筋强度（Branlard等，2001）和面包综合品质（Bronnke等，2000）中表现优异。特别是延展性方面，Bx13亚基是Glu-B1位点上贡献最高的一个亚基,与小麦烘烤品质密切相关。因此，研究普通小麦高分子量麦谷蛋白亚基的组成和分布，特别是Glu-B1位点上Bx13亚基，对小麦品质育种有重要意义。

在亚基鉴定检测方面，SDS-PAGE鉴定法局限性大，如亚基迁移率不规则，产品多样性差等，因此PCR技术被广泛应用到生命科学的各个领域。专用引物的设计是PCR技术的关键环节，但是到目前为止，可用于检测HMW-GS的专用引物有N、Bx17+By18、Bx14+By15等，有些麦谷蛋白的专用引物由于特异性弱、灵敏性低、重复性差、缺乏可靠的核苷酸序列等原因，尚不具备或仍需改善。学者对Bx13亚基的研究和统计基本是通过Bx13+By16亚基组合开展，对Bx13亚基进行单独的专用引物设计和研究较少，因此进一步发掘并验证Bx13亚基专用引物，尤其是更方便、灵敏、准确的Bx13亚基专用引物意义重大。通过分析研究小麦优质亚基的变异和亚基分布情况，有利于了解普通小麦种质资源的性状，为小麦品质育种的亲本选择和有利基因的发掘和利用提供相关信息。

发明内容

本发明的一个目的是提供鉴定或辅助鉴定麦谷蛋白亚基Bx13基因的引物。

本发明提供的引物，由序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成。

上述引物中，所述麦谷蛋白亚基Bx13基因来源于普通小麦Triticum aestivum L.。

本发明的第二个目的是提供鉴定或辅助鉴定麦谷蛋白亚基Bx13基因的PCR试剂。

本发明提供的PCR试剂，包括上述的引物。

上述PCR试剂由PCR扩增缓冲液、权利要求1或2所述的引物、dNTP、DNA聚合酶和水组成；

所述引物中的各条引物在所述PCR试剂中的终浓度为0.2uM。

上述PCR试剂中，所述麦谷蛋白亚基Bx13基因来源于普通小麦Triticum aestivum L.。

本发明的第三个目的是提供鉴定或辅助鉴定麦谷蛋白亚基Bx13基因的试剂盒。

本发明提供的试剂盒，包括上述的引物或上述的PCR试剂。

上述试剂盒中，所述麦谷蛋白亚基Bx13基因来源于普通小麦Triticum aestivum L.。

上述的引物或上述的PCR试剂或上述的试剂盒在测鉴定或辅助鉴定麦谷蛋白亚基Bx13基因中的应用也是本发明保护的范围。

上述应用中，所述麦谷蛋白亚基Bx13基因来源于普通小麦Triticum aestivum L.。