[发明专利]一种检测细胞凋亡的HSV1-TK分子影像探针及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201410098159.1 | 申请日： | 2014-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN103834740A | 公开（公告）日： | 2014-06-04 |
| 发明（设计）人： | 王福;王琰;武文娇;夏玉琼;曾琦;梁继民;田捷 | 申请（专利权）人： | 西安电子科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02;C12N15/66;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 龚燮英 |
| 地址： | 710071*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 细胞 hsv1 tk 分子 影像 探针 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测细胞凋亡的HSV1-TK分子影像探针的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）用限制性内切酶HindIII和XhoI酶切载体pcDNA3.1，使其线性化；（2）PCR扩增蛋白内含子DnaE的C端DnaEc、TK基因的C端TKc、TK基因的N端TKn、DnaE的N端DnaEn，以及公司化学合成DEVD序列，其序列为5’-gatgaagtcgac-3’；（3）通过基因重组技术将上述各个片段DnaEc、TKc、DEVD、TKn、DnaEn依次与线性化的pcDNA3.1载体重组；（4）重组载体经过转化、提取质粒、酶切鉴定，获得HSV1-TK探针；HSV1－TK探针的第76位、266位和276位氨基酸位点为插入DEVD的位点。
2.根据权利要求1所述的构建方法构建的检测细胞凋亡的HSV1-TK分子影像探针，其包含启动子、蛋白内含子DnaE的C端，TK基因的C端，DEVD序列，TK基因的N端，蛋白内含子DnaE的N端，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求2所述的HSV1-TK分子影像探针在活体监测细胞凋亡的发生发展中的应用。
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