[发明专利]组合物、试剂盒及其用途和用其分析氨基酸方法有效
申请号: | 201410048846.2 | 申请日: | 2014-02-12 |
公开(公告)号: | CN103823014B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 于丽;刘桂兰;姜铭姝;刘俊琦;王德辉 | 申请(专利权)人: | 长春大合生物技术开发有限公司 |
主分类号: | G01N30/90 | 分类号: | G01N30/90 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司11285 | 代理人: | 钟守期,王媛 |
地址: | 130300 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 组合 试剂盒 及其 用途 分析 氨基酸 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种组合物和试剂盒,其用于分析氨基酸、特别是发酵液中氨基酸的用途,还涉及用其分析氨基酸、特别是发酵液中氨基酸的方法。
背景技术
目前,分析发酵液中的氨基酸成份主要使用以下方法:1)高效液相色谱或氨基酸分析仪,这两种方法虽然能进行定量分析,但是所用仪器价格昂贵,很难普及;2)纸层析法,此法虽然对设备要求不高,也相对比较方便,但此法每次层析时间长,通常需要2-3小时,总分析时间则长达4小时,并且传统纸层析法采用喷雾显色,易显色不均或冲散色斑,影响分析判断。
赵建国等在文献《薄层色谱法分离僵蝉蛋白中蛋白质和氨基酸类成分的研究》,湖南中医学院报,2005年4月,第25卷,第2期:第26-29页公开了一种僵蝉蛋白质和氨基酸类成分的薄层色谱分离鉴别方法,虽然该方法可以实现僵蝉蛋白质中氨基酸的分析,但展开时间即需要90分钟,总分析时间更长,且可分析的氨基酸的种类有限。
发明内容
本发明提供一种组合物,所述组合物为含有醇、酸、水和茚三酮的混合物。所述组合物可用于分析氨基酸、特别是发酵液中的氨基酸。
在本发明组合物的一个实施方案中,其中含有醇、酸、水和茚三酮的混合物由醇、酸、水与茚三酮配制而成,所述醇为正丁醇和一种或多种选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、叔丙醇、异丁醇、叔丁醇、正戊醇、异戊醇的醇混合物。在本发明组合物的一个优选实施方案中,所述醇为正丁醇和乙醇的醇混合物。在本发明组合物的一个优选实施方案中,所述醇混合物混合摩尔比1/1-5/1。
在本发明组合物的一个优选实施方案中,其中含有醇、酸、水和茚三酮的混合物由醇、酸、水与茚三酮配制而成。在本发明组合物的一个优选实施方案中,其中含有醇、酸、水和茚三酮的混合物由醇、酸、水与固体茚三酮配制而成。
在本发明组合物的一个优选实施方案中,其中酸选自甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、冰乙酸。在本发明组合物的一个更优选实施方案中,酸为冰乙酸。
在本发明组合物的一个优选实施方案中,醇的量为20-50摩尔%,酸的量为10-35摩尔%,水的量为30-60摩尔%,基于所述醇、酸和水的量之和为100摩尔%计;茚三酮的量为每1升溶剂0.2-10克。
本发明还提供一种试剂盒,所述试剂盒包括选自下列之一的容器:
容纳含有醇、酸、水和茚三酮混合物的容器;
容纳含有醇、酸和水的容器和容纳含有茚三酮的容器;或
分别容纳含有醇、酸、水的容器和容纳含有茚三酮的容器;或
分别容纳含有醇、酸、水中的任选两种的容器和含有醇、酸、水中另外一种物质的容器以及容纳含有茚三酮的容器,
所述醇为正丁醇和任一种选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、叔丙醇、异丁醇、叔丁醇、正戊醇、异戊醇的醇混合物。在本发明试剂盒的一个优选实施方案中,所述醇为正丁醇和乙醇的醇混合物。在本发明试剂盒的一个优选实施方案中,所述醇混合物的混合摩尔比1/1-5/1。
在本发明试剂盒的一个优选实施方案中,其中含有醇、酸、水和茚三酮的混合物由醇、酸、水与固体茚三酮配制而成;或者,所述容纳含有茚三酮的容器中容纳的是固体茚三酮。
在本发明试剂盒的一个优选实施方案中,本发明的试剂盒中还包括平板,其由塑料、玻璃、陶瓷等组成。
在本发明试剂盒的一个更优选的实施方案中,本发明的试剂盒还包括含有对比样的容器。
在本发明试剂盒的各种实施方案中,前述对于组合物各优选实施方案的描述同样适用,并构成相应的优选、更优选的实施方案。
本发明还提供本发明的组合物或试剂盒用于分析氨基酸的用途。
在本发明用途的一个优选实施方案中,其中待分析的氨基酸为发酵液中的氨基酸。
在本发明用途的一个优选实施方案中,其中的发酵液为发酵物用水稀释后得到的水溶液。
在本发明用途的一个更优选实施方案中,发酵液为发酵物用水稀释1-100倍得到的发酵液。
在本发明用途的一个优选实施方案中,其中发酵物以选自葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、玉米油、淀粉水解糖等的糖为底物并用选自德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳杆菌保加利亚亚种、德氏乳杆菌莱库南亚种(L.leichnanii)的微生物进行培养发酵获得。
在本发明用途的各实施方案中,所述氨基酸包括赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、精氨酸、组氨酸、丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸。
此外,本发明还提供一种分析氨基酸的方法,所述方法包括如下步骤:
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