[发明专利]一种丁酸梭菌分泌的抗菌肽及其制备方法和应用有效
申请号: | 201410030648.3 | 申请日: | 2014-01-23 |
公开(公告)号: | CN103772494A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 汪以真;栾超 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C07K14/33 | 分类号: | C07K14/33;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;C12P21/02;A23K1/17;C12R1/145 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 林松海 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丁酸 分泌 抗菌 及其 制备 方法 应用 | ||
1. 一种丁酸梭菌分泌的抗菌肽,其特征是,从丁酸梭菌分泌产物中分离达到的一种单链多肽,分子量是2264.6,等电点8.64,多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示为:PSAWQITKCAGSIAWALGSGIF,该抗菌肽具有抗菌活性,对E. coli K 88的最小抑菌浓度为32 μg/mL,S. aureus最小抑菌浓度为64 μg/ml,且对猪的红细胞不会产生溶血作用。
2. 一种根据权利要求1所述的抗菌肽的制备方法,其特征是,将丁酸梭菌置于严格厌氧条件培养24小时后离心,收集培养上清并用硫酸铵沉淀法富集所述的抗菌肽,经离子交换、分子筛层析和反相高效液相色谱纯化。
3.根据根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,所述的离子交换为:将硫酸铵沉淀后得到的样品透析,上样于阳离子交换柱,用含0~0.5M NaCl的缓冲液梯度洗脱,收集洗脱的蛋白。
4.根据根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,所述的分子筛层析为:将离子交换得到的活性成分透析,上样于分子筛层析柱,用缓冲液洗脱,收集第四个峰。
5.根据根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,所述的反向高效液相色谱为:将分子筛层析得到的活性物质上样于C18柱,用含0.1%的乙腈从10~60%梯度洗脱,收集45min处峰。
6. 一种根据权利要求1所述的抗菌肽的应用,作为饲料的抗菌制剂。
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