[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）SZ-60，其特征在于，其保藏号为CGMCC No.8277。

2.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌SZ-60，其特征在于，该菌株在牛肉膏蛋白胨（NB）培养基上单细胞繁殖生长形成的菌落不规则、乳白色、中心稍隆起、表面湿润、半透明。镜检呈杆状，大小为0.3～0.4×3.2～3.3μm，具鞭毛，G﹣，有芽孢。其能在25℃～40℃的温度下生长，其最适生长温度为32℃。其生长pH范围为6.5～8.0，最适生长pH为7.2。需氧生长；硝酸盐还原反应生成红色化合物。接触酶测定为阳性；脂肪酶反应为阴性；酪蛋白、酪氨酸反应呈阴性。不能利用D-葡萄糖、D-木糖。淀粉水解试验镜检有糊精生成。明胶液化试验呈阳性；柠檬酸盐利用试验培养基呈酸性(绿色)。V-P(pH7.0)测定生成红色化合物；L-阿拉伯糖、甘露醇检测呈阳性；在含有2%～5%的NaCl的牛肉膏蛋白胨（NB）培养基上均能生长。

所述的牛肉膏蛋白胨（NB）培养基的配方为：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl5.0g，琼脂17g，水1000mL，pH6.8～7.2。

3.如权利要求1或2所述的解淀粉芽孢杆菌SZ-60在防治植物真菌病害中的应用，或在制备防治植物真菌病害的微生物制剂中的应用。

优选地，所述植物为人参。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述真菌为腐皮镰孢菌(Fusarium solani)、毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destructans)、人参链格孢菌(Alternaria panax)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、恶疫霉菌(Phytophthora cactorum)和人参核盘菌(Sclerotinia schinseng)中的一种或多种。

5.一种微生物制剂，其特征在于，含有权利要求1的解淀粉芽孢杆菌SZ-60的全培养液培养物和解淀粉芽孢杆菌SZ-60的孢子。

6.如权利要求5所述的微生物制剂，其特征在于，其是通过以下制备方法制备得到的：

（1）将如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌SZ-60试管种接种于用1000mL三角瓶装的300mL营养肉汤酵母膏（NBY）培养液中，在180r/min，30℃下培养36小时，获得发酵菌液；

（2）将发酵菌液在以种子罐体积20%接种于种子罐中的发酵培养液中发酵培养，溶氧量为18～20%，搅拌速度200rpm，种子罐的温度30～34℃，接种发酵菌液4小时后，每隔2小时对种子罐中的发酵液进行发酵质量检测，直到发酵液菌体生长比较饱满即将出现芽孢时，获得发酵菌种，种子罐中的发酵时间为12～16小时；

（3）将种子罐中发酵菌种的10%接种于发酵罐中的NBY培养液中发酵培养，溶氧量为18～20%，搅拌速度200rpm，发酵罐的温度30～34℃，接种发酵菌种4小时后，每隔2小时对发酵罐中的发酵液进行发酵质量检测，观察菌含量，直到发酵罐中发酵液中的最终培养物（包含菌和芽孢）生物量为10⁹cfu/ml以上、芽孢含量大于或等于90%时，立即将发酵液出罐，进行分装，获得SZ-60微生物制剂；发酵罐中的发酵时间为24～36小时。

优选地，所述的NBY培养液的配方为：牛肉膏3.5g，蛋白胨10.0g，酵母浸膏5.0g，麦芽浸膏10g，葡萄糖5.0g，水1000mL，pH6.8～7.2；所述的发酵培养液的配方以重量百分比计为：大豆粉2.0%，豆饼粉1.5%，淀粉0.5%，酵母浸膏0.2%，玉米浆0.2%，NaCl0.1%，Ca(HCO₃)₂0.2%，余量为水，pH7.0～7.2。

更优选地，所述的NBY培养液是这样配制的：称取牛肉膏、蛋白胨、酵母浸膏、麦芽浸膏、葡萄糖放入1000mL水中，充分混匀后将pH调整至6.8～7.2，1000mL三角瓶中装量为300mL培养液，用双层封口膜封好三角瓶口，121℃湿热灭菌30分钟，冷却后备用；

所述的发酵培养液是这样配制的：在种子罐中加入所需的水，按比例加入大豆粉、豆饼粉、淀粉、酵母浸膏、玉米浆、NaCl、Ca(HCO₃)₂，充分搅拌，将发酵培养液pH调整到7.0～7.2，密封加料孔，用高温蒸汽灭菌2小时，冷却后立即接种。