[发明专利]通过重组酵母生产3-羟基丙酸

权利要求书

1.一种重组酵母细胞，该重组酵母细胞包括：(1)一种主动3-HP途径，该主动3-HP途径通过β-丙氨酸中间体进行，以及(2)一种异源多核苷酸，该异源多核苷酸编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)，其中该细胞能够产生3-HP，且该细胞包括一种编码天冬氨酸1-脱羧酶(ADC)的异源多核苷酸。

2.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该ADC与SEQ ID NO:17、18、133、135、137或139的氨基酸序列具有至少99％或100％序列一致性。

3.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该ADC具有一种氨基酸序列，该氨基酸序列包括SEQ ID NO:17、18、133、135、137或139或者由其组成。

4.如权利要求1-3中任一项所述的重组酵母细胞，其中该非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)与SEQ ID NO:154、155、156、157、158、159、160、161、162、189、190、192或194的氨基酸序列具有至少99％或100％序列一致性。

5.如权利要求1-3中任一项所述的重组酵母细胞，其中该非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)具有一种氨基酸序列，该氨基酸序列包括SEQ ID NO:154、155、156、157、158、159、160、161、162、189、190、192或194或者由其组成。

6.如权利要求1-3中任一项所述的重组酵母细胞，其中编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的该异源多核苷酸包括一种对GAPN编码序列而言外源的启动子。

7.如权利要求1-3中任一项所述的重组酵母细胞，其中当在相同条件下培养时，与不具有编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的该异源多核苷酸的细胞相比，该重组酵母细胞能够产生更大量的3-HP。

8.如权利要求7所述的重组酵母细胞，其中当在相同条件下培养时，与不具有编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的该异源多核苷酸的细胞相比，该重组酵母细胞能够产生多至少10％的3-HP。

9.如权利要求8所述的重组酵母细胞，其中当在相同条件下培养时，与不具有编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的该异源多核苷酸的细胞相比，该重组酵母细胞能够产生多至少15％的3-HP。

10.如权利要求9所述的重组酵母细胞，其中当在相同条件下培养时，与不具有编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的该异源多核苷酸的细胞相比，该重组酵母细胞能够产生多至少20％的3-HP。

11.如权利要求9所述的重组酵母细胞，其中当在相同条件下培养时，与不具有编码非磷酸化NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的该异源多核苷酸的细胞相比，该重组酵母细胞能够产生多至少25％的3-HP。

12.如权利要求1-3中任一项所述的重组酵母细胞，其中所述细胞进一步包括对一个或多个内源基因的破坏，该一个或多个内源基因编码丙酮酸脱羧酶(PDC)、醇脱氢酶(ADH)、半乳糖激酶GAL6、L-(+)-乳酸-细胞色素c氧化还原酶CYB2A、L-(+)-乳酸-细胞色素c氧化还原酶CYB2B、甘油3-磷酸脱氢酶(GPD)、甘油3-磷酸酶(GPP)、醛脱氢酶(ALD)或PEP羧激酶(PCK)。

13.如权利要求12所述的重组酵母细胞，其中所述细胞进一步包括对一个编码PDC的内源基因的破坏。