[发明专利]AGSE缺陷菌株有效

专利信息
申请号: 201380038233.4 申请日: 2013-07-19
公开(公告)号: CN105308171B 公开(公告)日: 2019-03-08
发明(设计)人: 诺尔·尼克拉斯·玛利亚·伊丽莎白·范·佩吉;马帝那·贝舒森;彼得·约瑟夫·艾达·范德·沃恩德沃尔特 申请(专利权)人: 帝斯曼知识产权资产管理有限公司
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12N9/10;C12N9/00;C12N9/04;C12N9/20;C12P21/02
代理公司: 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 代理人: 肖善强
地址: 荷兰*** 国省代码: 荷兰;NL
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摘要:
搜索关键词: agse 缺陷 菌株
【权利要求书】:

1. 一种突变微生物宿主细胞,其中所述突变微生物宿主细胞是选自黑曲霉(Aspergillus niger)、泡盛曲霉(Aspergillus awamori)、臭曲霉(Aspergillus foetidus)、酱油曲霉(Aspergillus sojae)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)和米曲霉(Aspergillus oryzae)物种的曲霉菌(Aspergillus),其已在其基因组中被修饰,以导致与未被修饰的亲本微生物宿主细胞相比并且在相同条件下测量时,在选自以下的多肽的生成上缺陷:

a. 根据SEQ ID NO: 3的多肽或与其至少85%相同并且具有根据SEQ ID NO: 3的多肽的至少一种活性的多肽;

b. SEQ ID NO: 3中包含的成熟多肽或与其至少85%相同并且具有SEQ ID NO: 3中包含的成熟多肽的至少一种活性的多肽;

c. 根据SEQ ID NO: 1或2的多核苷酸编码的或与SEQ ID NO: 1或2至少85%相同的多核苷酸编码的多肽,其中根据SEQ ID NO: 1或2的多核苷酸编码的所述多肽具有根据SEQID NO: 1或2的多核苷酸编码的多肽的至少一种活性;

其中根据a.- c.所述的多肽具有a-1,3-葡聚糖合酶[EC 2.4.1.183]酶活性, 其中所述突变微生物宿主细胞包含编码目标化合物的至少一种多核苷酸或编码在目标化合物的生成中所涉及的化合物的至少一种多核苷酸,其中编码目标化合物的所述至少一种多核苷酸或编码在目标化合物的生成中所涉及的化合物的所述至少一种多核苷酸与启动子可操作地连接,其中所述目标化合物是酶,

其中其基因组中的所述修饰选自:

i)完全或部分缺失c.中定义的多核苷酸;

ii)用不编码a.-c.中定义的多肽或编码a. 至c.中所定义多肽的部分或完全失活形式的多核苷酸序列完全或部分置换c.中定义的多核苷酸;

iii)通过在多核苷酸序列中插入一个或更多个核苷酸来破坏c.中所定义的多核苷酸,从而部分或完全失活a.至c.中所定义的多肽。

2. 根据权利要求1所述的突变微生物宿主细胞,其中SEQ ID NO: 3中包含的所述成熟多肽为根据SEQ ID NO: 4的成熟多肽。

3. 根据前述权利要求中任一项所述的突变微生物宿主细胞,其中所述修饰包括:

a)与未被修饰的亲本微生物宿主细胞相比,在相同条件下分析时,导致权利要求1a.-1c.中定义的多肽生成减少或不生成的修饰,和/或

b)与未被修饰的亲本微生物宿主细胞相比,在相同条件下分析时,生成活性降低或没有活性的源自权利要求1a.-1c.所定义多肽的修饰。

4.根据权利要求1或2所述的突变微生物宿主细胞,其中编码目标化合物的所述至少一种多核苷酸或编码在目标化合物的生成中所涉及的化合物的所述至少一种多核苷酸与诱导型启动子可操作地连接。

5.根据权利要求1或2所述的突变微生物宿主细胞,其中所述启动子为碳水化合物诱导型启动子。

6.根据权利要求5所述的突变微生物宿主细胞,其中所述碳水化合物诱导型启动子选自淀粉诱导型启动子的启动子,葡糖淀粉酶启动子、酸稳定性淀粉酶启动子、α-淀粉酶启动子和TAKA淀粉酶启动子。

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