[发明专利]用于流式细胞术的样品制备

权利要求书

1.一种针对活的微生物的量分析样品的方法，包含：

获得针对至少一种目标微生物的存在或不存在的待测样品；

制备样品；

加入包含过量的减少背景信号的分子的减少背景信号的物质，其中所述减少背景信号的分子选自具有结构Y-(CH＝CH)_n-CH＝Z的分子或者它的盐，其中，

Y为并且是以苯基取代的，或融合至选自苯基或萘基的芳族部分，或是未取代的；

n是0或者直到5的整数；

X是碳或者硫；

R₁可选择地是氢、具有1-6个碳原子的烷基、亚硫酸基或者烷基胺，并且可以进行选择以便使减少背景信号的分子进入活目标微生物的细胞渗透性降低；并且

Z与Y相同或不同；

加入渗透和标记微生物的目标活细胞的核酸染色剂；以及

分析制备好的样品，

其中减少背景信号的分子以与核酸染色剂类似的方式和类似的效率与非目标颗粒结合，并且其中所述方法不以诊断为目的。

2.根据权利要求1所述的方法，其中样品选自食物样品、环境样品、化妆品样品和生物样品。

3.根据权利要求1所述的方法，其中当与样品结合时，减少背景信号的分子的浓度为从0.1μM到50μM。

4.根据权利要求1所述的方法，其中当与样品结合时，减少背景信号的分子的浓度为从0.1μM到10μM。

5.根据权利要求1所述的方法，其中当与样品结合时，减少背景信号的分子的浓度为从0.5μM到5μM。

6.根据权利要求1所述的方法，其中加入核酸染色剂之前，与样品一起培养减少背景信号的分子2分钟到1小时。

7.根据权利要求1所述的方法，其中加入核酸染色剂之前，与样品一起培养减少背景信号的分子2分钟到30分钟。

8.根据权利要求1所述的方法，其中加入核酸染色剂之前，利用样品培养减少背景信号的分子2分钟到5分钟。

9.根据权利要求1所述的方法，其中猝灭剂附加于减少背景信号的分子。

10.根据权利要求1所述的方法，其中减少背景信号的分子是半花菁或者闭链花菁。

11.根据权利要求1所述的方法，其中n是0或者直到3的整数。

12.根据权利要求1所述的方法，其中Y融合至选自苯基或萘基的芳族部分，

其中苯基或萘基可以是未取代的或是以1-6个碳原子的-O-烷基或QG基取代的，其中所述QG基是荧光信号猝灭基团。

13.根据权利要求12所述的方法，其中n是0或者直到3的整数；X是硫，R₁是烷基胺。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述减少背景信号的分子选自：

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述减少背景信号的分子与核酸染色剂相继加入或者与核酸染色剂同时加入。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述制备好的样品通过流式细胞术进行分析。

17.根据权利要求16所述的方法，其中背景信号强度降低至少90％。

18.根据权利要求16所述的方法，其中背景信号强度降低至少70％。

19.根据权利要求16所述的方法，其中背景信号强度降低至少50％。