[发明专利]一种固体海洋红酵母制剂及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201310561341.1 | 申请日: | 2013-11-13 |
| 公开(公告)号: | CN103614307A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
| 发明(设计)人: | 杨莺莺;杨铿;李卓佳;陈永青;梁晓华;徐创文;文国樑 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
| 主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;A23K1/18;A23K1/16 |
| 代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华 |
| 地址: | 510300 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 固体 海洋 酵母 制剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种固体海洋红酵母制剂,其特征是:它主要由复合保护剂和浓缩的海洋红酵母菌泥制成,二者的质量比为1.5~2.2︰1,所述的复合保护剂包括脱脂奶粉、蔗糖和水,所述的固体海洋红酵母制剂中海洋红酵母的细胞密度为2000~4000亿/克,细胞活性为70~80%。
2.根据权利要求1所述的固体海洋红酵母制剂,其特征是:所述复合保护剂中脱脂奶粉的质量百分含量为5%,蔗糖的质量百分含量为10%。
3.根据权利要求1所述的固体海洋红酵母制剂,其特征是:所述的浓缩的海洋红酵母菌泥通过如下方法制备获得:
(1) 活化传代培养:以海洋红酵母胶红酵母为菌种,以种子培养液为培养基,菌种采用斜面活化传代,培养温度为24~30℃,培养时间为36~48小时;
(2) 摇瓶扩大培养:挑取2~3环斜面活化传代后的菌种接种于150mL种子培养液中,在24~30℃、150~250 rpm条件下摇瓶培养28~36小时;然后,将培养液按5~10%的质量百分含量转接种于3L~5L种子培养液中,按相同条件进行再次培养;
(3) 种子罐扩大培养:将摇瓶扩大培养后的培养液按5~10%的质量百分含量接种入30L种子培养液中,调节通气量为1:0.6V.V.m, 通气搅拌速度为300~450 rpm、温度为24~30℃培养22~28h,接着将培养液按5~10%的质量百分含量转接种于500L种子培养液中,按相同条件进行再次培养;
(4) 发酵罐培养:将经种子罐扩大培养的培养液按5~10%的质量百分含量转接于发酵培养液中,通气量为1:0.6 V.V.m,搅拌速度为300~450 rpm,温度为24~30℃,通气培养20~28h;在发酵培养过程中流加氨水,流加氨水的用量以发酵液pH5.0为控制点,当发酵罐内的溶氧开始上升时,终止发酵;
(5) 离心、洗涤、浓缩:发酵液经离心分离,得到浓缩的酵母菌泥,浓缩后的酵母菌泥经水洗后再次离心浓缩处理,4℃低温保存得到的浓缩的海洋红酵母菌泥。
4.根据权利要求3所述的固体海洋红酵母制剂,其特征是:步骤(1)-(3)中采用的种子培养液含以下重量份的组分:水1000、 葡萄糖35~45、蛋白胨 1.8~2.2、 酵母粉 5.5~6.5、 磷酸二氢钾 0.8~1.2、磷酸二氢钠 2.8~3.2、硫酸镁 7.0~8.0、氯化钾 2.8~3.2、氯化钠 5~15,其pH为5.0~5.5,该种子培养液在使用前经121℃下高压灭菌20分钟。
5.根据权利要求3所述的固体海洋红酵母制剂,其特征是:步骤(4)中采用的发酵培养液含有以下重量份的组分:水1000、葡萄糖80~110、蛋白胨 3.0~4.0、 酵母粉 5~7、 磷酸二氢钾 0.8~1.2、磷酸二氢钠 2.8~3.2、硫酸镁7.0~8.0、氯化钾2.8~3.2、氯化钠 8~12,其pH为5.0~5.5,该发酵培养液在使用前经121℃下高压灭菌20分钟。
6.根据权利要求3所述的固体海洋红酵母制剂,其特征是:步骤(5)中离心分离时,离心机的转速为4000~6000rpm,离心时间为10~20min。
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