[发明专利]HBV B 基因型1799G>C 突变作为分子标记的应用及试剂盒

权利要求书

1.第1799位G/C多态性作为分子标记在制备提示HBV B基因型感染者疾病进程趋势的试剂或试剂盒中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，基于所述的试剂或试剂盒的扩增产物的DNA测序结果，依据第1799位G/C多态性给出的野生型或突变型的提示：第1799位为G则为野生型，第1799位为C则为突变型。

3.HBV B基因型第1799位的G>C突变在制备提示HBV B基因型感染者演变成肝硬化/肝癌进程可能性的试剂或药物中作为靶点的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的试剂或药物作出提示还依赖于DNA测序结果。

5.一种提示HBV B基因型感染者疾病进程趋势的试剂盒，其特征在于，包括基于HBV的PreS2、S区的分型检测引物对、检测1799位点突变的BCP区扩增引物对、以及含有DNA扩增酶和底物的PCR反应液；

该试剂盒还包括一个基于扩增产物DNA测序结果的提示卡，提示卡提示第1799位为G则为野生型，第1799位为C则为突变型；其中突变型的感染者具有巨大可能性导致感染乙肝病毒后演变成肝硬化/肝癌。

6.如权利要求5所述的提示HBV B基因型感染者疾病进程趋势的试剂盒，其特征在于，所述的分型检测引物对包括：

PreS2、S外巢上游引物：atgtgtctgc ggcgttttat；

PreS2、S外巢下游引物：actttccaat caatagg；

PreS2、S内巢上游引物：gttgtaaaac gacggccagg ttgcccgttt gtc；

PreS2、S内巢下游引物：actttccaat caatagg；

所述的BCP区扩增引物对包括：

BCP外巢上游引物：tcgcttcacc tctgcac；

BCP外巢下游引物：aaaaaagtca gaaggcaaaa a；

BCP内巢上游引物：gttgtaaaac gacggccaga atgtcaacga ccgacctt；

BCP内巢下游引物：aaaaaagtca gaaggcaaaa a。

7.如权利要求6所述的提示HBV B基因型感染者疾病进程趋势的试剂盒，其特征在于，所述PreS2、S区的分型检测引物对、BCP区扩增引物对扩增使用同样巢式程序，其扩增程序包括：

第一轮外巢扩增：95℃预变性5min；94℃变性30s、52℃退火30s、72℃延伸50s，40个循环数；72℃延伸5min；

第二轮内巢扩增：95℃预变性5min；94℃变性30s、52℃退火30s、72℃延伸50s，30个循环数；72℃延伸5min。