[发明专利]一种蝇蛆肽的制备方法有效
申请号: | 201310355021.0 | 申请日: | 2013-08-15 |
公开(公告)号: | CN103397068A | 公开(公告)日: | 2013-11-20 |
发明(设计)人: | 武金霞;张贺迎 | 申请(专利权)人: | 河北大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C12R1/69;C12R1/685;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/04 |
代理公司: | 石家庄国域专利商标事务所有限公司 13112 | 代理人: | 白海静 |
地址: | 071002 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蝇蛆肽 制备 方法 | ||
1.一种蝇蛆肽的制备方法,其包括以下步骤:
a、将可产生蛋白酶的微生物菌种接种到无菌培养基中,通气培养,得到微生物孢子或菌体;
b、将微生物孢子或菌体接种到以蝇蛆蛋白为唯一氮源的培养基中,发酵培养12~100小时,去除菌丝球或菌体,获得蝇蛆肽溶液;
c、将蝇蛆肽溶液,低温干燥,得到蝇蛆肽。
2.根据权利要求1所述蝇蛆肽的制备方法,其特征在于:所述可产蛋白酶的安全微生物菌种是米曲霉、黑曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、放线菌中任意一种。
3.根据权利要求1或2所述蝇蛆肽的制备方法,其特征在于:a步骤所述培养基是察氏培养基、PDA培养基、麸皮豆粕培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基中任意一种。
4.根据权利要求3所述蝇蛆肽的备方法,其特征在于所述麸皮豆粕培养基,其配方以质量百分比计为,豆粕30-40%, 麸皮10-_15_%,发酵豆粕浸提物0.1-1.0%,其余为水。
5.根据权利要求1或2所述蝇蛆肽的制备方法,其特征在于:a步骤所述通气培养,其温度为20-40℃,时间为2-7天。
6.根据权利要求1或2所述蝇蛆肽的制备方法,其特征在于:b步骤所述以蝇蛆蛋白为唯一氮源的培养基,其制备方法是向新鲜蝇蛆或干蝇蛆充分浸泡后加入生理盐水或0.1-0.2mol/L pH6.5-8.0的磷酸盐缓冲液,于4-10℃下,匀浆或研磨10-20h,离心或过滤,除去固体不溶物,收集液体,调节至蛋白质浓度为20-30mg/mL,向其中加入碳水化合物,使碳水化合物的质量浓度为2-8%。
7.根据权利要求6所述蝇蛆肽的制备方法,其征在于:所述碳水化合物为蔗糖、葡萄糖、糖蜜、淀粉、转化糖中任意一种。
8.根据权利要求6所述蝇蛆肽的制备方法,其征在于:所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液中任意一种。
9.根据权利要求1或2所述蝇蛆肽的制备方法,其征在于:b步骤所述发酵培养,其条件为20-40℃,10-400r/min摇瓶震荡,通气培养12-100h。
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