[发明专利]一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法有效
申请号: | 201310331785.6 | 申请日: | 2013-08-01 |
公开(公告)号: | CN103555779A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 史锋;江君君;李永富;李烨 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12R1/15 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 何自刚;王玉松 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 生产 氨基 丁酸 方法 | ||
1.一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法,其特征在于以表达谷氨酸脱羧酶的基因工程菌为生产菌株,经种子培养基活化,菌株浓度到达对数生长中后期后,接种到发酵培养基,控制尿素起始浓度为0.4%,发酵起始6h-24h补加尿素0.2%/次,直到其浓度为1.6%停止;调节发酵温度为30℃,往复式摇床110rpm,连续培养120小时;所述表达谷氨酸脱羧酶的基因工程菌的构建方法为化学全合成或PCR方法获得谷氨酸脱羧酶基因gadB1、gadB2,将其通过表达载体共同导入谷氨酸棒杆菌ATCC13032。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于所述谷氨酸脱羧酶基因gadB1、gadB2核苷酸序列分别如NCBI公布的LVIS_1847和LVIS_0079所示。
3.权利要求1或2所述的方法,其特征在于所述表达载体为pDXW-10。
4.权利要求1所述的方法,其特征在于所述种子培养基组成为:种子培养基质量分数%:葡萄糖2.5,玉米浆3,尿素0.8,K2HPO4·3H2O0.1,MgSO40.02,pH7.2。
5.权利要求1或2所述的方法,其特征在于所述发酵培养基组成为:发酵培养基质量分数%:葡萄糖10,玉米浆0.4,尿素1.6,K2HPO4·3H2O0.2,MgSO40.04,MnSO4·7H2O0.02,FeSO4·7H2O0.029,pH7.2。
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