[发明专利]一种microRNA检测试剂盒和多生物素分子检测microRNA的方法

权利要求书

1.一种microRNA检测试剂盒，其特征在于，包括捕获分子和捕获桥分子，所述捕获分子为寡核苷酸，包被于固相上；所述捕获桥分子为DNA，一端能与捕获分子部分杂交，另一端能与待测microRNA部分杂交；

还包括放大桥分子和放大分子，所述放大分子包括载体分子和标记分子，所述载体分子为DNA或RNA，所述标记分子为生物素标记的多核苷酸，一个载体分子通过多核苷酸与多个生物素分子相连；所述放大桥分子为DNA，一端能与待测microRNA分子部分杂交，另一端能与载体分子部分杂交。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的载体分子通过多核苷酸与2-100个生物素分子相连。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的载体分子通过化学合成或生物合成。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的多核苷酸可由15-50个一种或多种核苷酸组成。

5.使用权利要求1所述的试剂盒检测microRNA分子的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）将待测microRNA分子与放大桥分子、捕获桥分子一起加入到固相上进行杂交，42-50℃孵育12-16小时，待测microRNA分子通过捕获桥分子与预包被在固相上的捕获分子的特异识别而捕获到固相上；

（2）洗去未结合于固相上的microRNA分子和放大桥分子、捕获桥分子，将放大分子加入到固相上，42-50℃孵育0.5-1小时；

（3）将标记物标记的链霉亲和素或亲和素加入到固相上，室温孵育半个小时；

（4）通过链霉亲和素或亲和素上的标记物的特征反应，实现microRNA分子检测。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，链霉亲和素或亲和素上的标记物为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶。