[发明专利]一种针对鼠传病原的悬浮芯片多重非诊断性检测方法

权利要求书

1.一种针对鼠传病原的悬浮芯片多重非诊断性检测方法，其特征在于，该非诊断性检测具体为：

1）根据PCR扩增区域内的核苷酸序列设计特异性检测引物，并提交GENEBANK检测引物的特异性，合成时将上游引物5’末端连接特异Tag，下游引物5’末端进行生物素标记；

2）PCR反应结束后将反应产物分别与相应的编码微球杂交；

3）微球上的Anti-Tag在一定的条件下特异的捕获PCR产物上的Tag序列；

4）加入链霉亲和素－藻红蛋白与微球上捕获的PCR产物上的生物素结合，利用悬浮芯片LUMINEX系统进行检测，通过激发微球基质上的红色分类荧光和微球表面经特异性反应结合上的藻红蛋白，对待检测物进行定性和定量分析；

其中，所涉及的引物序列为：

。

2.如权利要求1所述的非诊断性检测方法，其特征在于，所述引物上游引物5’端需要人工添加一段标签并且之间用间隔序列相连，下游引物5’端经生物素标记。

3.如权利要求1所述的非诊断性检测方法，其特征在于，所述杂交中同时加入微球，PCR扩增产物，SA-PE，条件为42℃进行杂交，同时此条件下可以进行链霉亲和素－藻红蛋白与微球上捕获的PCR产物上的生物素结合。

4.一种改进的针对鼠传病原的悬浮芯片多重非诊断性检测方法，其特征在于，所述非诊断性检测方法包括以下步骤：

1）PCR扩增待检样品；

2）加入相应的微球与PCR产物杂交；

3）上机对杂交后的微球进行检测；

其中，根据待检测的病毒，设计检测所用的特异引物，上游引物5’末端连接特异Tag，引物与Tag之间连接C9或C18作为加臂，下游引物5’末端进行生物素标记。

5.如权利要求4所述的非诊断性检测方法，其特征在于，所述非诊断性检测方法涉及的引物序列为：

。

6.如权利要求5所述的非诊断性检测方法，其特征在于，所述引物上游引物5’端需要人工添加一段标签并且之间用间隔序列相连，下游引物5’端经生物素标记。

7.如权利要求4所述的非诊断性检测方法，其特征在于，所述杂交中同时加入微球，PCR扩增产物，SA-PE，条件为42℃进行杂交，同时此条件下可以进行链霉亲和素－藻红蛋白与微球上捕获的PCR产物上的生物素结合。

8.如权利要求4所述的非诊断性检测方法，其特征在于，所述扩增条件为：