[发明专利]泛素特异性蛋白酶7的选择性和可逆性抑制剂

说明书

本发明涉及泛素特异性蛋白酶的新的选择性和可逆的抑制剂的发现，其制备过程和其治疗用途。

泛素特异性蛋白酶(USP)是属于去泛素化酶(DUB)家族的半胱氨酸蛋白酶。

泛素-蛋白酶体系统的失调已经牵涉于多种人类疾病的发病机理，包括癌症(Hoeller等人Nat Rev Cancer2006，6(10)，776-788)，神经退行性疾病(Rubinsztein，Nature2006，443(7113)，780-786)和病毒感染(Gao&Luo Can J Physiol Pharmacol2006，84(1)，5-14)。在多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤的治疗上蛋白酶体抑制剂(硼替佐米)的市场成功，已经建立起该系统作为癌症治疗的有效靶标(Adams，Nat Rev Cancer2004，4(5)，349-360)。有前途的替代物靶向蛋白酶体本身将会干扰上游泛素共轭/去共轭机制，以产生更特异性的，低毒性抗癌剂。

单和多泛素化可以通过特异性切割泛素的羧基端的异肽键的去泛素化酶被逆转。泛素特异性蛋白酶和泛素羧基端水解酶(UCH)酶是DUB家族的最佳表征成员(Komander等人Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2009，10(8)，550-63；Nijman等人Cell2005，123(5)，773-786)。UCH被认为是优先切割小蛋白质底物及主要是参与泛素的加工和回收利用，但其具体功能仍然知之甚少。USP构成DUB的最大亚家族，有超过60个成员。其从特定的蛋白质底物中去除泛素，因此防止了其靶向蛋白酶体或调节其亚细胞定位和激活(Daviet&Colland，Biochimie2008，90(2)，270-83)。基于其蛋白酶活性及参与多种人类疾病，USP正在成为泛素调节机制的药理干预的潜在靶标(Colland，BiochemSoc Trans2010，38，137-43)。

USP7(泛素特异性蛋白酶7)/HAUSP(疱疹相关泛素特异性蛋白酶)是USP家族的135kDa蛋白。USP7已被证明与病毒蛋白质相互作用，所 述病毒蛋白质如ICP0(VMW110)、刺激病毒裂解周期的起始的单纯疱疹病毒立即早期基因(Everett等人，J Virol73，1999，417-426)、和EBNAl(EB核抗原-1，Epstein-Barr Nuclear Antigen-1)(Holowaty等人，J Biol Chem2003，278，29987-29994和47753-47761)。人类蛋白质，如p53和p53的主要E3连接酶，MDM2，也被鉴定为USP7的伴侣和底物(Cummins等人Nature2004，486，Cummins&Vogelstein，Cell Cycle，2004，3，689-692；Li等人Mol Cell2004，13，879-886；Li等人Nature2002，416，648-653)。更广泛地，USP7可以使不同的靶标去泛素化，所述靶标包括Mdm2和p53，且此类后期靶标的网络去泛素化(net deubiquitination)最终决定了功能性p53的水平。与最近的报道一致的是USP7沉默也已显示出通过促进Mdm2降解以增加稳态p53的水平。最近显示出TSPYL5调节USP7和p53的结合，所述TSPYL5是通过与p53竞争结合至USP7上的相同区域而潜在参与乳腺癌形成的蛋白质(Epping等人，Nat Cell Biol.2011，13(I)：102-8)。最近，通过产生组成性的高p53水平，USP7的上调和下调均被证明抑制体外结肠癌细胞的增殖和体内肿瘤的生长(Becker等人Cell Cycle2008，7(9)，1205-13)。