[发明专利]含有4-1BBL的佐剂组合物

说明书

美国政府的基金支持

本发明的工作部分受到NIH肯塔基肺癌研究项目W.M.Keck基金会和肯塔基研究测试信托基金（Kentucky Research Challenge Trust Fund）联合会给予的基金资助。本发明是在国家健康研究所（National Institutes of Health）颁发的款项R41CA121665，R44AI071618和R43AI074176的政府支持下做出的。政府享有本发明中的一些权利。

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年2月10日提交的美国临时申请第61/441,392号的申请日的权益。

技术领域

本发明总体上涉及当将诸如单磷酰脂质A（MPL）之类的toll-样受体（TLR）激动剂与4-1BBL联合作为佐剂时所观察到的意想不到的有效协同效应，以及加强针对抗原的免疫反应的相关组合物和方法，以及预防和治疗包括癌症在内的疾病的相关方法。

背景技术

治疗性疫苗为常规癌症治疗的优选替代方法，这主要是由于治疗性疫苗的安全特性以及治疗性疫苗产生长期免疫记忆，长期免疫记忆对于控制疾病的复发至关重要，复发是癌症死亡的主要原因。基于肿瘤相关抗原（TAA）的治疗性疫苗尤其受到关注，因为其易于生产、可规模化生产、易于储存以及可给药于众多患者群。然而，由于中枢和外周耐受机制，这种疫苗的效力因自身TAA的弱的抗原性质而被减弱（1，2）。尽管本领域中不断产生有良好前景的结果，但是也存在超过二十年的跟踪记录显示癌症疫苗失败。类似的失败结果还在其他免疫环境中发现，包括针对感染性疾病、自身抗原的疫苗和针对诸如毒素和成瘾性药物之类的半抗原的疫苗。

3-O-去酰基-4’-单磷酰脂质A（MPL）是FDA批准的无毒形式的脂多糖，其用作针对HPV感染的预防性疫苗的佐剂成分（5）。也将MPL作为其他环境中的佐剂进行研究。MPL是toll-样受体4（TLR-4）激动剂，该激动剂例如，脂质A，脂多糖和其他结构相关化合物。CpG是结构上不具有相似性的TLR激动剂。MPL主要靶向先天性免疫，导致诸如树突细胞（DC）之类的抗原呈递细胞（APC）的募集、活化和成熟，所述树突细胞促进获得性免疫反应的产生（6）。

4-1BBL为TNF家族的成员。4-1BBL为靶向CD8⁺T细胞的共刺激分子，从而活化CD8⁺T细胞、使CD8⁺T细胞获得效应功能、使CD8⁺T细胞存活并实现长期记忆（15-17）。4-1BBL还能够刺激CD4⁺Treg细胞，从而诱导针对给定抗原的耐受性（美国专利第7,745,215号）。4-1BBL在细胞表面表达并且在可溶形式中不起作用。4-1BBL的细胞外功能结构域可融合于链霉亲和素（SA）的改良形式以产生嵌合分子（SA-4-1BBL），该嵌合分子由于SA的结构特征而以四聚体和寡聚体的形式存在（12）。

发明内容

本发明涉及如下意想不到的发现：诸如单磷酰脂质A（MPL）之类的toll-样受体（TLR）激动剂和4-1BBL作为佐剂组合物在诱导针对联合施用的抗原的免疫反应方面的协同效应。在一些实施方式中，本发明提供含有4-1BBL和TLR激动剂的组合物。在一些实施方式中，TLR激动剂为TLR4激动剂，例如，脂多糖、脂质A或化学类似物（例如，MPL）。在一些实施方式中，本发明提供包含4-1BBL和MPL的组合物。4-1BBL可以为融合蛋白，例如，链霉亲和素-4-1BBL融合蛋白。在一些实施方式中，4-1BBL融合蛋白通过链霉亲和素部分形成更高级的结构，例如，三聚体和聚集体。在一些实施方式中，所述组合物还包括药学上可接受的赋形剂。