[发明专利]重组耐热短链脱氢酶基因、编码酶、载体、工程菌及应用

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一种重组耐热短链脱氢酶基因、基因编码酶、重组载体、工程菌及基因编码酶在制备光学手性醇中的应用。

（二）背景技术

短链脱氢酶属于羰基还原酶（EC1.1.1.184）。在生物体中，羰基还原酶既可将酮底物还原为相应的醇，也可催反向反应，将醇氧化为相应的酮或醛；这些反应需要辅助因子的存在，如：NADH、NADPH、NAD或NADP。其中NADH、NADPH作为电子供体，NAD、NADP作为电子受体。在工业上，羰基还原酶已被越来越多的用于还原各类酮产生相应的手性醇；催化形式既可以是全细胞，也可以是纯化过的酶。从实际成本的角度考虑，羰基还原酶在应用于酮还原反应时，往往会涉及到一个辅酶再生系统，如利用葡萄糖脱氢酶(GDH)或甲酸脱氢酶(FDH)进行辅助因子（NADH或NADPH）的再生，从而显著减少辅助因子的用量。

根据底物特异性和酶的动力学参数，羰基还原酶主要分为醛酮还原酶家族、短链脱氢酶家族和中链脱氢酶家族。鉴于有机合成反应中化合物的多样性及反应环境的复杂性，有必要找到更多热稳定较好的羰基还原酶。

（三）发明内容

本发明目的是提供一种重组耐热短链脱氢酶基因、基因编码酶、重组载体、工程菌及基因编码酶在制备光学手性醇中的应用。

本发明采用的技术方案是：

一种重组耐热短链脱氢酶基因，所述重组耐热短链脱氢酶基因具有与SEQ ID No.1所示核苷酸序列90%以上同源性，优选所述基因核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，所述重组耐热短链脱氢酶基因还包括SEQ ID No.1所示核苷酸序列经过一个或几个核苷酸序列取代、缺失或添加获得的核苷酸序列。

进一步，SEQ ID No.1所示核苷酸序列全长为747bp，其编码序列从第一个碱基起至第744碱基止，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG，该序列无内含子。

所述SEQ ID No.1所示核苷酸序列为：

atgggcttca aagataaagt ggttgtggtt accggctctg gtcgtggcat tggtcgcagt     60

atcgccaaaa tgtatgcaga acatggtgcg aaagtggtta tcgcggatcg taactttcag    120

gaagccctgg aaacggaacg cctgatttct gaagaaggcg gtgaagccat ggcagtgctg    180

gcggatgtta gtaaaccgga agatgtgatc aacctgatgg aaaaaatcga aaaaagctat    240

ggccgtctgg atattctgat caacaatgcc ggctttggtt gctggaaaag cccgtacgat    300

ctgaccgtgg aagaatggga ttctgttatc aacaccaatc tgcgtggcac gttcctgtgt    360

agccgcgaag cggccaaaat tatgaaaaaa ggcggtggcg gtgcaattgt gaacatcgcc    420

agtacccgcg caatcatgag cgaaccgaat agcgaatctt atgcagcgtc taaaggtggt    480

atcctggcac tgacgcacgc actggcaatt agtctgggtc cggatcgtat tcgcgttaac    540

gcaatcagcc cgggctggat tgaaaccggt gaatacgaaa aactgcgtga aatcgatcat    600

ctgcagcacc cggcaggtcg tgtgggtaaa ccggaagtaa ttgcacgcgc gtgcctgttt    660

ctgaccgcag aagaaaacag cttcatcacg ggtgcgaatc tggttattga tggcggtatg    720

acccggaaga tgatttatga accatag747

本发明提供一种由所述重组耐热短链脱氢酶基因编码的重组耐热短链脱氢酶。

进一步，所述重组耐热短链脱氢酶具有与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列90%以上的同源性，优选所述重组耐热短链脱氢酶的氨基酸序列为SEQ ID No.2所示。