[发明专利]一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法

说明书

技术领域

本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法。

背景技术

蛹虫草也称北冬虫夏草、北蛹虫草、虫草等，其有效成分和冬虫夏草类似。

自然界中野生蛹虫草的资源稀缺，其产量受自然环境和气候的影响很大，根本满足不了人们的需求，目前市场上的蛹虫草产品大多是人工培养的，人工培养的方式为：（1）采集野生的蛹虫草进行菌种的分离、纯化，然后将蛹虫草菌接种在固体培养基上，于20-25℃及一定的湿度和光照条件下培养，经35-45d子实体即可达到采收。姜明兰等用野生菌进行组织分离，在PDA培养基上分离、纯化出优良的原种，经人工驯化的原种在PDA液体培养基中扩大培养后，接种到大米培养基上，成功获得子实体。张显科等研究认为，高粱米、小米、玉米渣和蚕蛹可以代替大米栽培蛹虫草；（2）用液体深层发酵的方法人工生产蛹虫草菌丝体。采用液体发酵的方法获得菌丝体可以高效快速的得到某些有效成分，缩短生产周期。不少科研工作者对液体深层发酵的条件进行了探索。刘苗苗等用响应曲面法优化蛹虫草液体培养条件，得出了蛹虫草培养中最佳碳氮比和培养时间；唐芳荣，昌艳等以传统工业废料玉米浆、豆饼粉等作培养基，并对培养条件进行了优化。汪宇等以发酵得率为指标优化培养基成分，初步得到蛹虫草液体培养条件和生长动力学，为蛹虫草液体培养工业化生产提供了一定的理论依据；（3）采用缫丝厂副产物干的桑蚕或柞蚕蛹，通过复水后高温灭菌，然后接种，在18-23℃发菌，约30d左右发菌完毕，然后将蛹体照光，一定时间后可获得蛹虫草。

目前，采用大米发酵也是获得虫草子实体的重要方式，但是由于大米中缺少虫体中特有的蛋白等营养物质，所获得的子实体虫草素等有效成分的含量偏低，质量难以保证，更有不法者以无机氮源代替有机氮，使获得的子实体中主要活性成分虫草素的含量很低，甚至没有，干扰了蛹虫草的市场。

发明内容

本发明的目的是针对上述现状，旨在提供一种出草整齐、培养时间短、操作方便、成功率高，虫草商品性好的柞蚕蛹虫草盒式培养方法。

本发明目的的实现方式为，一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，具体步骤如下：

（1）接种前准备

①挑出蚕茧中混合的死蚕蛹，用水洗掉蚕蛹表面的尘土及夹带的毛片，晾干蚕蛹体表面水分，用臭氧或紫外线消毒30min；

②制备虫草培养基：250ml三角瓶中装110-130ml液体培养基，用接种针在试管斜面培养基上刮取需用量的菌块，放于三角瓶中，每瓶4-6个菌块；23℃静止培养24小时后摇床转速90r/min轻摇，36h后摇床转速120-130r/m，培养3-5天菌种较粘稠并有菌球出现；

（2）接种

将液体菌种用10目无菌滤网过滤至灭过菌的罐头瓶内，整个过程保持无菌操作，滤液中添加滤液体积0.5-1.0倍的无菌水；接种时先用5ml注射器吸取菌液，从蚕蛹尾部数第二节处注射，注射深度1-2cm，每个蚕蛹的注射量0.1-0.5ml；

（3）蚕蛹僵化

接种完毕后单层摆放在已消毒的培养室内的培养架上，温度控制在16-18℃， 1-3天接种处变干结痂；然后将蚕蛹转移到灭过菌的培养盘内，每个蚕蛹之间留有空隙，单层摆放，升温至13-18℃，每天通风30±10min， 4天后蚕蛹的尾部即僵化变硬；僵化时间7-10天，待环节处有菌丝出现，表示僵化完成；

（4）出草管理

将僵化好的蚕蛹摆放在盒内，盒内加10-20ml水，盒上覆盖透明塑料薄膜，两端留通气孔，温度保持在20-23℃，开始阶段湿度70-80%，光线200-400 Lx，草长出来后，湿度85%以上，温度20-23℃，每天通风8-15min；

（5）接种后的40-50天采收，采收时保持虫草完整，不要折断，采收后立即烘干，避光保存。

本发明根据蚕蛹生理特点，采用蚕蛹盒式培养法，解决了柞蚕蛹栽培虫草栽培过程中感染率低、易受杂菌污染、出草率低等问题；可充分灭菌，盒内温、湿度易控制、调节，能充分光照，易采收。本发明出草整齐、培养时间短、操作方便、成功率高达95%以上，虫草商品性好。

具体实施方式