[发明专利]一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法

权利要求书

1.一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，其特征在于具体步骤如下：

（1）接种前准备

①挑出蚕茧中混合的死蚕蛹，用水洗掉蚕蛹表面的尘土及夹带的毛片，晾干蚕蛹体表面水分，用臭氧或紫外线消毒30min；

②制备虫草培养基：250ml三角瓶中装110-130ml液体培养基，用接种针在试管斜面培养基上刮取需用量的菌块，放于三角瓶中，每瓶4-6个菌块；23℃静止培养24小时后摇床转速90r/min轻摇，36h后摇床转速120-130r/m，培养3-5天菌种较粘稠并有菌球出现；

（2）接种

将液体菌种用10目无菌滤网过滤至灭过菌的罐头瓶内，整个过程保持无菌操作，滤液中添加滤液体积0.5-1.0倍的无菌水；接种时先用5ml注射器吸取菌液，从蚕蛹尾部数第二节处注射，注射深度1-2cm，每个蚕蛹的注射量0.1-0.5ml；

（3）蚕蛹僵化

接种完毕后单层摆放在已消毒的培养室内的培养架上，温度控制在16-18℃， 1-3天接种处变干结痂；然后将蚕蛹转移到灭过菌的培养盘内，每个蚕蛹之间留有空隙，单层摆放，升温至13-18℃，每天通风30±10min， 4天后蚕蛹的尾部即僵化变硬；僵化时间7-10天，待环节处有菌丝出现，表示僵化完成；

（4）出草管理

将僵化好的蚕蛹摆放在盒内，盒内加10-20ml水，盒上覆盖透明塑料薄膜，两端留通气孔，温度保持在20-23℃，开始阶段湿度70-80%，光线200-400 Lx，草长出来后，湿度85%以上，温度20-23℃，每天通风8-15min；

（5）接种后的40-50天采收，采收时保持虫草完整，不要折断，采收后立即烘干，避光保存。

2.根据权利要求1所述的一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，其特征在于250ml三角瓶中所装110-130ml液体培养基为PDA培养基。

3.根据权利1所述一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，其特征在于蚕蛹的尾部僵化变硬，伤口处流出的体液沾到其它蚕蛹上，用70%酒精擦拭消毒。

4.根据权利要求1所述的一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，其特征在于尾部未僵化、有伤口的蚕蛹捡出。

5.根据权利1所述一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，其特征在于培养架层高45±5cm，宽度60±6cm，长度80±8cm，培养架上铺一层塑料窗纱单层摆放，培养室内放一台臭氧发生器。

6.根据权利1所述一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法，其特征在将僵化好的蚕蛹摆放在长30±5cm、宽20±2cm、深10±1cm方形，有通气孔的塑料盒内。