[发明专利]一种柞蚕微孢子虫株(系)的分离、培养及保存的方法有效

专利信息
申请号: 201811361297.9 申请日: 2018-11-15
公开(公告)号: CN109486680B 公开(公告)日: 2022-02-08
发明(设计)人: 岳冬梅;范琦;王林美;李佩佩;叶博;赵振军;张波 申请(专利权)人: 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所
主分类号: C12N1/02 分类号: C12N1/02;C12N1/10;C12R1/90
代理公司: 大连东方专利代理有限责任公司 21212 代理人: 刘慧娟;李馨
地址: 116024 辽*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明公开了一种柞蚕微孢子虫株(系)分离、培养及保存的方法。利用柞蚕精巢或卵巢组织制备原代细胞,分离、培养柞蚕微孢子虫;利用柞蚕蛹期滞育可以长期储存的特点,将柞蚕原代细胞分离、培养的柞蚕微孢子虫经发芽后注射入健康柞蚕蛹体进行继代培养和长期保存;通过原代细胞分离、培养和蛹体增殖、保存的交替、循环进行,经多次传代后可分离出纯净微孢子虫株(系)。该技术体系无需依赖稳定细胞系,突破了尚未有稳定柞蚕细胞株(系)建立而柞蚕微孢子虫在其他昆虫细胞系中不增殖的瓶颈。方法简单易行,分离、保存的微孢子虫株(系)纯净、活力高。本发明为进一步探索柞蚕微孢子虫侵染、传播规律和提升柞蚕微粒子病防控效果提供了有力支持。
搜索关键词: 一种 柞蚕 孢子 分离 培养 保存 方法
【主权项】:
1.一种柞蚕微孢子虫株(系)分离方法,其特征在于,包含如下步骤:(1)获得健康柞蚕精巢或卵巢原代细胞;(2)从已感染柞蚕微孢子虫的柞蚕材料中获得感染柞蚕微孢子虫的柞蚕精巢或卵巢原代细胞,并通过与步骤(1)获得的柞蚕原代细胞混合,进行柞蚕微孢子虫的培养与增殖;(3)从步骤(2)获得的混合培养物中提取柞蚕微孢子虫,进行发芽处理后注射入健康柞蚕蛹体内进行继代培养与增殖;(4)取步骤(3)获得的柞蚕蛹作为步骤(2)的材料依次进行步骤(2)和(3);(5)重复步骤(4)多次,实现柞蚕微孢子虫株(系)在柞蚕精巢或卵巢原代细胞中的分离。
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  • 一种高通量快速筛选高产咖啡酸菌种的方法-202111362147.1
  • 刘人铭;孙敬方 - 中国药科大学
  • 2021-11-17 - 2023-07-04 - C12N1/02
  • 本发明公开了一种高通量快速筛选高产咖啡酸菌种的方法,属于生物工程技术领域。本发明的方法包括将待筛选的菌株进行发酵,得到发酵液;将所得发酵液离心获得发酵上清液;将发酵上清液置于多孔板;向发酵上清液中加入氯化铁反应液进行显色反应,使用全波长酶标仪检测680nm下的OD值;选取OD值高的咖啡酸生产菌株即可。本发明的高通量筛选方法可以大幅提高菌株的筛选效率,大幅增加单批次筛选的菌株数量,缩短咖啡酸高产菌株的筛选实验周期。
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