[发明专利]微生物絮凝剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及絮凝剂，尤其涉及微生物絮凝剂的制备方法。

背景技术

微生物絮凝剂是微生物在生长过程中所产生的代谢物，其主要成分为多糖、糖蛋白、蛋白质、纤维素、核酸等。与其他絮凝剂相比，微生物絮凝剂具有种类多、来源广、培养条件粗放、絮凝性能好、无环境毒性等特点。由于传统的絮凝剂存在不同的缺陷，尤其是一定量的铝系絮凝剂和聚丙烯酰胺絮凝剂具有环境毒性。因此，微生物絮凝剂自从问世以来便受到广泛的关注，微生物絮凝剂具有重要的研究价值和应用前景。

微生物絮凝剂产生菌来源广泛，种类较多。至今发现的具有絮凝性的微生物近80种，其中细菌、真菌、放线菌及藻类均有分布，这些具有絮凝活性、被人关注的微生物大都筛选自土壤、淤泥、污水。目前，微生物絮凝剂的制备多利用糖或工业产品作为生产原料，成本偏高，制约了微生物絮凝剂工业化的生产和大规模的应用。

解决上述问题需要从两个方面入手：一是积极寻找廉价的原材料，大幅度降低生产成本；二是针对生物絮凝的理化性质和用途，选择合理的工业化提取工艺和使用方法。

发明内容

本发明解决的技术问题是克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种工艺简单、成本低、产量高、周期短、能有效治理污染的微生物絮凝剂的制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种微生物絮凝剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(A1)制备种子培养基；

(A2)培养种子液：将活的菌株接种到所述种子培养基中以制备种子液；

(A3)制备山核桃发酵培养基；

(A4)发酵培养菌种：将所述种子液接种到所述山核桃发酵培养基以制备所述菌株的发酵液；

(A5)制备絮凝剂制品：将所述发酵液离心分离，加提取剂获得絮凝沉淀物，再离心分离和干燥制备成絮凝剂制品。

根据上述的制备方法，可选地，所述步骤(A1)进一步包括以下步骤：

(B1)将牛肉膏0.3-4.0％、蛋白胨0.5-2.0％、氯化钠0.2-1.0％在pH7.0-7.8环境下培养，培养温度20-30℃，转速150-250r/min；

(B2)培养时间16-22h，至菌浓1.0×108-5.0×108CFU/mL。

根据上述的制备方法，优选地，所述牛肉膏2.2％、蛋白胨1.2％、氯化钠0.6％在pH7.4环境下培养，培养温度25℃，转速200r/min；培养时间19h。

根据上述的制备方法，可选地，所述步骤(A1)进一步包括以下步骤：

(B1)可溶性淀粉1-3％、K₂HPO₄0.01-0.08％、NaNO₃0.05-0.15％、MgSO₄·7H₂O0.01-0.08％、KCl0.01-0.08％，pH＝7.5～8.5，在0.5-1.5kg/cm²压力下灭菌10-50min。

根据上述的制备方法，优选地，可溶性淀粉2％、K₂HPO₄0.05％、NaNO₃0.1％、MgSO₄·7H₂O0.05％、KCl 0.05％，1.05kg/cm²压力下灭菌30min。

根据上述的制备方法，可选地，所述步骤(A3)进一步包括以下步骤：

(C1)将山核桃废水稀释至COD为4000～8000mg/L，得稀释后的山核桃废水；

(C2)在每升稀释后的山核桃废水中加入葡萄糖1.0～10g、磷酸氢二钾1～3g、硫酸铵0.2～2g、硫酸镁0.1～0.3g和氯化钠0.01～0.1g，然后调节pH至7～8。

根据上述的制备方法，优选地，所述COD为6000mg/L，在每升稀释后的山核桃废水中加入葡萄糖5.5g、磷酸氢二钾2g、硫酸铵1.1g、硫酸镁0.2g和氯化钠0.055g，然后调节pH至7.5。

根据上述的制备方法，可选地，所述步骤(A4)进一步包括以下步骤：

(D1)将山核桃培养基进行高压蒸汽灭菌；

(D2)将所述种子液以3-10％的比例接种到所述山核桃发酵培养基中，于20～40℃、摇床转速为150～250r/min的条件下培养24～32h，获得发酵液。