[发明专利]微生物絮凝剂的制备方法

权利要求书

1.一种微生物絮凝剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(A1)制备种子培养基；

(A2)培养种子液：将活的菌株接种到所述种子培养基中以制备种子液；

(A3)制备山核桃发酵培养基；

(A4)发酵培养菌种：将所述种子液接种到所述山核桃发酵培养基以制备所述菌株的发酵液；

(A5)制备絮凝剂制品：将所述发酵液离心分离，加提取剂获得絮凝沉淀物，再离心分离和干燥制备成絮凝剂制品。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(A1)进一步包括以下步骤：

(B1)将牛肉膏0.3-4.0％、蛋白胨0.5-2.0％、氯化钠0.2-1.0％在pH7.0-7.8环境下培养，培养温度20-30℃，转速150-250r/min；

(B2)培养时间16-22h，至菌浓1.0×108-5.0×108CFU/mL。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述牛肉膏2.2％、蛋白胨1.2％、氯化钠0.6％在pH7.4环境下培养，培养温度25℃，转速200r/min；培养时间19h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(A1)进一步包括以下步骤：

(B1)可溶性淀粉1-3％、K₂HPO₄0.01-0.08％、NaNO₃0.05-0.15％、MgSO₄·7H₂O0.01-0.08％、KCl0.01-0.08％，pH＝7.5～8.5，在0.5-1.5kg/cm²压力下灭菌10-50min。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：可溶性淀粉2％、K₂HPO₄0.05％、NaNO₃0.1％、MgSO₄·7H₂O0.05％、KCl 0.05％，1.05kg/cm²压力下灭菌30min。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(A3)进一步包括以下步骤：

(C1)将山核桃废水稀释至COD为4000～8000mg/L，得稀释后的山核桃废水；

(C2)在每升稀释后的山核桃废水中加入葡萄糖1.0～10g、磷酸氢二钾1～3g、硫酸铵0.2～2g、硫酸镁0.1～0.3g和氯化钠0.01～0.1g，然后调节pH至7～8。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述COD为6000mg/L，在每升稀释后的山核桃废水中加入葡萄糖5.5g、磷酸氢二钾2g、硫酸铵1.1g、硫酸镁0.2g和氯化钠0.055g，然后调节pH至7.5。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(A4)进一步包括以下步骤：

(D1)将山核桃培养基进行高压蒸汽灭菌；

(D2)将所述种子液以3-10％的比例接种到所述山核桃发酵培养基中，于20～40℃、摇床转速为150～250r/min的条件下培养24～32h，获得发酵液。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：将所述种子液以6％的比例接种到所述山核桃发酵培养基中，于30℃、摇床转速为200r/min的条件下培养30h，获得发酵液。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(A5)进一步包括以下步骤：

(E1)将获得的所述发酵液在4000-8000r/min的条件下离心10-20min，收集上清液，按体积比加入2-4倍的提取剂，搅拌均匀并静置沉淀3-8h；

(E2)在4000-6000r/min条件下离心，弃上清液，收集沉淀并干燥至恒重，得到固体微生物絮凝剂制品。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于：将获得的所述发酵液在6000r/min的条件下离心15min，收集上清液，按体积比加入3倍的提取剂，搅拌均匀并静置沉淀6h；

在5000r/min条件下离心，弃上清液，收集沉淀并干燥至恒重，得到固体微生物絮凝剂制品。