[发明专利]一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株及其培养方法与应用

权利要求书

1.一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var.kluyveri)菌株SS1-5，在2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC NO：4494。

2.权利要求1所述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Picchia kluyveri var.kluyveri)菌株SS1-5的培养方法，其特征在于，步骤如下：

（1）用接种环取克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株SS1-5，接种于YEPD固体培养基，在25～28℃条件下，活化培养40～48h，制得活化菌株；

（2）将步骤（1）制得的活化菌株接种于YEPD液体培养基中，在25～28℃条件下，培养15～20h，制得种子液；

（3）将步骤（2）制得的种子液按照2～5%（v/v）接种于麦芽汁液体培养基中，在25～28℃条件下，培养32～40h，即得生产用种子液。

3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（1）中的YEPD固体培养基每升组分如下：葡萄糖20克，酵母粉10克，蛋白胨10克，琼脂20克，用蒸馏水定容至1000毫升，pH值自然，115℃灭菌30min。

4.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（2）中的YEPD液体培养基每升组分如下：葡萄糖20克，酵母粉10克，蛋白胨10克，用蒸馏水定容至1000毫升，pH值自然，115℃灭菌30min。

5.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（3）中的麦芽汁液体培养基组分如下：麦芽汁浓度11～13°P，115℃灭菌30min，pH值自然。

6.权利要求1所述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var.kluyveri)菌株SS1-5在制备低醇饮料中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤如下：

（i）将原料大麦芽经糖化后，按照2～4g/kg的添加量添加酒花，糖化液温度70～80℃时静置20～40min，分离酒花糟及热凝固物，冷却，制得麦芽汁糖度为11～13°P；

（ii）按照体积比为2～5%的添加量向步骤（1）制得的麦芽汁中添加克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var.kluyveri)菌株SS1-5的生产用种子液，在20～24℃、通氧量为0.1m³/min条件下发酵培养7～9d，制得发酵液；

（iii）将步骤（1）制得的发酵液，经过滤、杀菌后，制得低醇饮料。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述步骤（i）中的糖化，步骤如下：

将原料大麦芽在50℃～55℃条件下投料至水中，保持35～45min；升温至63～68℃，保持55～65min；然后升温至70～75℃，保持12～18min，碘验；75～80℃保持8～12min；煮沸时间65～75min，煮沸强度不低于8%。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述大麦芽与水的质量比为1:（4.5～5.5）。