[发明专利]一种马铃薯中α-茄碱提取与检测的方法有效
申请号: | 201210321390.3 | 申请日: | 2012-09-03 |
公开(公告)号: | CN102866219A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 熊兴耀;曾建国;胡新喜;伍慧敏;曾静;李美 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
主分类号: | G01N30/78 | 分类号: | G01N30/78;C07J71/00 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 魏娟 |
地址: | 410128 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 马铃薯 提取 检测 方法 | ||
1.一种马铃薯中α-茄碱提取与检测的方法,其特征在于,步骤包括:
(1)α-茄碱提取
取新鲜马铃薯肉,用组织匀浆机粉碎成匀浆,称取样品置于瓶中,加入提取液,密封后,超声提取,将提取液过膜备用;
所述的提取液为体积比=1:1的质量浓度1%甲酸-水/甲醇、体积比=1:1的质量浓度1%盐酸-水/甲醇、质量浓度0.5%甲酸-水或质量浓度0.5%盐酸-水;
所述的超声提取在超声频率35kHz下提取时间为5~15min。
(2)液质联用检测α-茄碱
以α-茄碱m/z[M+H]+=868.78为目标离子,用选择离子监测模式定量,将标准对照液进样检测,以浓度(X,ppb)为横坐标,以峰面积(Y)为纵坐标,绘制标准曲线,得到回归方程,根据回归方程计算α-茄碱的含量。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,准确称取马铃薯肉0.5~1.5g;提取液用量为50~150mL。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的提取液为体积比=1:1的质量浓度1%甲酸-水/甲醇。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述超声提取是控制温度在35~45°C。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述膜的孔径为0.22μm。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的标准对照液逐步稀释配制成7.125ppb,14.25ppb,28.5ppb,57ppb,114ppb,228ppb,456ppb浓度的溶液进行测试,得到回归方程为Y=2664.1x+6505.5,R2=0.9991。
7.按照权利要求书1所述方法,其特征在于液质联用检测条件为:超高效液相色谱串联单四级杆质谱仪型号为UPLC-SQD MS,Waters;色谱柱型号为Unitary C18规格为2.1mm×150mm,5μm;流动相A为0.1%甲酸-水,流动相B为乙腈;梯度洗脱时间和洗脱液成份分别为0min(95%A,5%B),5min(50%A,50%B),6min(5%A,95%B);柱温为35°C;流速为0.2mL/min;进样量为5μL;离子源为电喷雾离子源,ESI正离子模式检测;毛细管电压为2.8kV;锥孔电压为30V;离子源温度为120°C;脱溶剂气温度为350°C;脱溶剂气流速为600L/hr;锥孔气流速为50L/hr。
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