本发明提供了一种碳碳双键还原酶及其用途。本发明提供了一种碳碳双键还原酶，所述还原酶包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明还提供了一种分离的多核苷酸，其编码所述的碳碳双键还原酶。本发明还提供了一种用于制备青藤碱的方法，所述方法包括使用所述碳碳双键还原酶将清风藤碱催化为异青藤碱的步骤。本发明提供的碳碳双键还原酶为青藤碱生物合成的关键酶基因，为实现青藤碱的合成生物学研究及产业化应用奠定坚实的基础。
本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9系统对博落回PDS基因编辑体系的构建方法，包括以下步骤：S1、根据SEQ ID NO.1所示的博落回PDS基因的编码区避开内含子区域设计一条如SEQ ID NO.3所示的靶序列；S2、利用步骤S1所述的靶序列，合成一对互补的靶序列，然后构建真核表达载体，筛选出连接正确的重组载体；S3、将步骤S2中连接正确的表达载体转化农杆菌，并进行博落回外植体的侵染，将外植体进行组织培养后，获得突变植株，构建了基于CRISPR/Cas9的博落回基因的构建体系，为首次在博落回植物中实现基因编辑，为博落回中功能基因挖掘、种质创新等提供有力途径。
