[发明专利]一种利用固定化黑曲霉发酵玉米糖液制备柠檬酸的方法

权利要求书

1.一种利用固定化黑曲霉发酵玉米糖液制备柠檬酸的方法，其特征在于发酵时，300 mL 三角瓶中放入50 mL发酵培养基，加入10 g固定化黑曲霉进行预培养后，在一定温度下，以一定转速的培养。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵培养基的制备：一定量的玉米糖液8～10Bx，加麸皮0.5 g/100 mL。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，玉米粉按5μ/g比例加入耐高温淀粉酶，再加约4倍重量水，95℃温度下，液化30 min，冷却调整至所需浓度备用。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，固定化细胞预培养的方法：将固定化黑曲霉载体浸泡在糖液浓度3～4 Bx发酵培养基中，摇瓶培养24 h；至孢子开始萌发时，停止培养；将培养基与载体分离，载体待用。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，细胞固定化方法：将10%聚合度1780的聚乙烯醇溶液加入1%硼砂，3%的甘油混合成复合凝胶；复合凝胶冷却到30℃，加入定量的菌丝体及孢子悬浮液，混匀，-40℃成型，制成5.0 mm×5.0 mm×5.0 mm 的固定化黑曲霉载体方块。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，玉米糖液浓度为14 Bx。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵温度为36℃。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵转速为240 rpm。