[发明专利]一种固定化谷胱甘肽合成酶及其制备和应用有效
| 申请号： | 201210306568.7 | 申请日： | 2012-08-24 |
| 公开（公告）号： | CN103627691B | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 杨晟;陶荣盛;洪秀娟;沈正权;朱傅赟;孙梁栋;陈成;沈青;郑云 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心 |
| 主分类号： | C12N11/00 | 分类号： | C12N11/00;C12N11/02;C12N11/08;C12P21/02 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 崔佳佳;马莉华 |
| 地址： | 313000 浙江省湖州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 固定 谷胱甘肽 合成 及其 制备 应用 | ||
1.一种固定化的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的固定化的谷胱甘肽合成酶包括：
(1)固定化载体；和
(2)固定于所述载体的谷胱甘肽合成酶，并且所述的固定化载体包括固定化载体的基质，以及与所述基质连接的连接元件，所述连接元件的主链具有4-20个选自C、N或O的原子，并且所述的固定化载体与所述的谷胱甘肽合成酶的质量比例为：10:1—50:1，所述的固定化载体为氨基固定化载体或环氧基固定化载体，其中所述氨基固定化载体选自下组： EC系列的EC-HA；所述环氧基固定化载体选自下组： EC系列的EC-EP或EC-HFA。
2.如权利要求1所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的谷胱甘肽合成酶通过选自下组的方式固定于固定化载体：吸附、包埋、共价结合、交联、或其组合。
3.如权利要求1所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的固定化载体与所述的谷胱甘肽合成酶的质量比例为10:0.6。
4.如权利要求1所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的固定化载体的基质为微球。
5.如权利要求1-4任一所述的固定化的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述固定化的谷胱甘肽合成酶具有以下特性：
(a)酶活性≥0.5U/g固定化的谷胱甘肽合成酶；
(b)半衰期特性≥10天。
6.如权利要求5所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，酶活性≥2U/g固定化的谷胱甘肽合成酶。
7.如权利要求5所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，半衰期特性≥15天。
8.如权利要求7所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，半衰期特性≥20天。
9.如权利要求1所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的氨基固定化载体选自下组：EC-HA。
10.如权利要求1所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的环氧基固定化载体选自下组：EC-HFA。
11.如权利要求1所述的固定化的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的谷胱甘肽合成酶选自下组：γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、GSH合成酶、或谷胱甘肽双功能合成酶、或其组合。
12.如权利要求11所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的谷胱甘肽合成酶为γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶与GSH合成酶的组合。
13.如权利要求12所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶与GSH合成酶的比例为1:1～5:1。
14.如权利要求12所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和GSH合成酶来源于大肠杆菌(Escherichia coli)。
15.如权利要求11所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的谷胱甘肽合成酶为谷胱甘肽双功能合成酶。
16.如权利要求15所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的谷胱甘肽双功能合成酶为来源于无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)或嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)的谷胱甘肽双功能合成酶。
17.如权利要求11所述的谷胱甘肽合成酶，其特征在于，所述的谷胱甘肽合成酶为谷胱甘肽双功能合成酶与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的组合；或谷胱甘肽合成酶为谷胱甘肽双功能合成酶与GSH合成酶的组合。
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