[发明专利]利用获取光的多发色团检测和分析多核苷酸的方法和组合物无效

专利信息
申请号: 201210282729.3 申请日: 2003-06-20
公开(公告)号: CN102766695A 公开(公告)日: 2012-11-07
发明(设计)人: G.C.巴赞;B.S.盖洛德 申请(专利权)人: 加州大学评议会
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;G01N21/63;G01N21/64
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 李波;万雪松
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 利用 获取 多发 检测 分析 多核苷酸 方法 组合
【权利要求书】:

1.一种测定方法,包括:

提供被怀疑含有目标多核苷酸的样品;

提供可与目标多核苷酸发生静电相互作用,并在激发可将能量转移至信号传递传递发色团的聚阳离子多发色团;

提供单链形式并与目标多核苷酸互补的传感肽核酸(PNA),该传感PNA与信号传递发色团缀合;

使样品在特定条件下与溶液中的传感PNA和多发色团接触,其中在上述条件下,如果存在目标多核苷酸,传感PNA可与其杂交;

向上述溶液施加可激发多发色团的光源;并

检测是否由信号传递发色团发射光。

2.权利要求1的方法,其中多发色团包括选自饱和聚合物、共轭聚合物、树枝状聚合物和半导体纳米晶体的结构。

3.权利要求2的方法,其中多发色团包括饱和聚合物。

4.权利要求2的方法,其中多发色团包括树枝状聚合物。

5.权利要求2的方法,其中多发色团包括半导体纳米晶体。

6.权利要求2的方法,其中多发色团包括共轭聚合物。

7.权利要求6的方法,其中共轭聚合物具有如下结构

8.权利要求6的方法,其中共轭聚合物具有如下结构

9.权利要求1的方法,其中样品与配比大约为1∶1的传感PNA和多发色团接触。

10.权利要求1的方法,其中样品在足量有机溶剂的存在条件下,与传感PNA和多发色团接触,上述有机溶剂的量足以降低传感PNA与多发色团之间的疏水相互作用。

11.权利要求1的方法,其中样品与具有相应不同序列的多种不同传感PNA接触,该不同传感PNA包含相应的不同信号传递发色团,其中上述不同传感PNA中的每一个均可与相应的不同目标多核苷酸选择性地杂交。

12.权利要求1的方法,其中发色团为荧光团。

13.权利要求12的方法,其中荧光团选自半导体纳米晶体、荧光染料和镧系金属螯合物。

14.权利要求13的方法,其中荧光团为半导体纳米晶体。

15.权利要求13的方法,其中荧光团为荧光染料。

16.权利要求15的方法,其中荧光染料为荧光素。

17.权利要求13的方法,其中荧光团为镧系金属螯合物。

18.权利要求1的方法,其中目标多核苷酸为DNA。

19.权利要求1的方法,其中目标多核苷酸为RNA。

20.权利要求1的方法,其中样品包含单链目标多核苷酸。

21.权利要求1的方法,其中样品包含双链目标多核苷酸。

22.权利要求1的方法,其中目标多核苷酸是通过扩增反应而得以制备的。

23.一种多核苷酸感测液,包含:

一种单链形式,并与目标多核苷酸互补的传感肽核酸(PNA),该传感PNA与信号传递发色团结合;

一种聚阳离子多发色团,可与目标多核苷酸的磷酸主链发生静电相互作用,且当其在传感PNA与目标多核苷酸杂交时被带入近程时,可在激发时将能量转移至信号传递发色团。

24.一种用于测定样品中的目标多核苷酸的试剂盒,包括:

一种单链形式,并与目标多核苷酸互补的传感肽核酸(PNA),该传感PNA与信号传递发色团结合;和

一种聚阳离子多发色团,可与目标多核苷酸的磷酸主链发生静电相互作用,且当其在传感PNA与目标多核苷酸杂交时被带入近程时,可在激发时将能量转移至信号传递发色团。

25.权利要求1的方法,其中由信号传递发色团发射的超过阈值水平的光,说明样品中存在目标多核苷酸。

26.权利要求1的方法,其中由信号传递发色团发射的光被定量,并用于测定样品中目标多核苷酸的量。

27.权利要求12的方法,其中荧光团为绿色荧光蛋白。

28.权利要求1的方法,其中目标多核苷酸未被扩增。

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