[发明专利]高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1. 一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗，其特征在于：其是含有高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株病毒和猪细小病毒混合的混合病毒抗原液的冻干疫苗，每头份冻干疫苗中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒含量为10^5-7TCID₅₀/ml，猪细小病毒病毒含量为10^5-7TCID₅₀/ml。

2. 根据权利要求1所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗，其特征在于：其还含有冻干保护剂。

3. 根据权利要求2所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗，其特征在于：所述冻干保护剂为蔗糖脱脂乳冻干保护剂，其用量与混合病毒抗原液的体积比为1:1。

4. 根据权利要求3所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗，其特征在于：所述蔗糖脱脂乳冻干保护剂是由以下组分组成：蔗糖5～10g、脱脂奶100ml。

5. 根据权利要求1或2所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗，其特征在于：每头份冻干疫苗中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒含量为10^5.5-6.5TCID₅₀/ml，猪细小病毒病毒含量为10^5.5-6.5TCID₅₀/ml。

6. 一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤

1）高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒液的制备：将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JXA1-R弱毒株按体积比为1%的量接种已长成单层的Marc-145细胞，旋转培养，当70%以上细胞出现细胞病变时，收获病毒细胞培养物，冻融后经离心或过滤除去细胞碎片，冻存于-40℃以下；

2）猪细小病毒液的制备：采用同步接种方法，在ST细胞分瓶传代的同时，按体积比为1～2%的量同步接种猪细小病毒弱毒株，培养至70%以上细胞出现细胞病变时，收获病毒细胞培养物，冻融后经离心或过滤除去细胞碎片，冻存于-20℃以下；

3）配苗及冻干：把上述步骤1）、2）得到的两种细胞培养毒液按冻干后疫苗每头份PRRSV病毒含量为10^5-7TCID₅₀/ml，PPV病毒含量为10^5-7TCID₅₀/ml计算出两种病毒液的配苗用量，按照计算出的用量混合，加入稳定剂，经冷冻真空干燥得到高致病性猪繁殖与呼吸综合征-猪细小病毒病二联活疫苗。

7. 根据权利要求6所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗的制备方法，其特征在于：步骤1）中旋转培养的温度为37℃，旋转速度为9～12转/小时。

8. 根据权利要求6所述的高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗的制备方法，其特征在于：步骤2）中培养时温度为37℃，培养时间为72～96小时。

9. 一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗在高致病性猪繁殖与呼吸综合征JXA1-R株-猪细小病毒病二联活疫苗质量标准建立中的应用。