[发明专利]来自辣椒疫霉菌的肉碱脂酰转移酶PCCAT2及其编码基因与应用有效
申请号: | 201210136687.2 | 申请日: | 2012-05-04 |
公开(公告)号: | CN102660514A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 张修国 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/48;A01N61/00;A01P3/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 271018 山东省泰安市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 来自 辣椒 霉菌 肉碱 转移酶 pccat2 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种蛋白,是如下a)或b)的蛋白质:
a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与辣椒疫霉菌致病性相关的由a)衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的核酸分子。
3.根据权利要求2所述的核酸分子,其特征在于:所述核酸分子为如下1)或2)或3)所示的基因:
1)其编码序列是序列表中序列1的DNA分子;
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白的DNA分子;
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90%以上的同源性且编码权利要求1所述蛋白的DNA分子。
4.下述1)-4)中的任一种生物材料:
1)含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒;
2)含有权利要求2或3所述核酸分子的重组表达载体;
3)含有权利要求2或3所述核酸分子的重组微生物;
4)含有权利要求2或3所述核酸分子的转基因细胞系。
5.制备权利要求1所述蛋白质的方法,包括将权利要求1所述的蛋白质的编码基因在生物细胞中进行表达得到权利要求1所述蛋白质的步骤;所述生物细胞为微生物细胞、植物细胞或非人动物细胞。
6.制备表达权利要求1所述蛋白质的重组微生物的方法,包括将权利要求1所述的蛋白质的编码基因导入宿主微生物细胞,得到表达权利要求1所述蛋白质的重组微生物的步骤。
7.权利要求1所述蛋白质、权利要求2或3所述的核酸分子或权利要求4所述的生物材料的应用,其特征在于:所述应用为下述1)-3)中任一种:
1)权利要求1所述的蛋白质在作为肉碱脂酰转移酶中的应用;
2)权利要求1所述的蛋白质在调控辣椒疫霉菌致病性中的应用;
3)权利要求2或3所述的核酸分子或权利要求4所述的生物材料在制备肉碱脂酰转移酶中的应用。
8.一种鉴定辣椒疫霉菌杀菌剂的方法,包括如下a)-e)中的任一步骤:
a)鉴定所述待检测物质是否抑制权利要求1所述蛋白质的表达,如所述待测物质能抑制权利要求1所述蛋白质的表达,则所述待测物质为候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;如所述待测物质不能抑制权利要求1所述蛋白质的表达,则所述待测物质为非候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;
b)鉴定所述待检测物质是否降低权利要求1所述蛋白质的表达水平,如所述待测物质能降低权利要求1所述蛋白质的表达水平,则所述待测物质为候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;如所述待测物质不能降低权利要求1所述蛋白质的表达水平,则所述待测物质为非候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;
c)鉴定所述待检测物质是否抑制权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录,如所述待测物质能抑制权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录,则所述待测物质为候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;如所述待测物质不能抑制权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录,则所述待测物质为非候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;
d)鉴定所述待检测物质是否降低权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录水平,如所述待测物质能降低权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录水平,则所述待测物质为候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;如所述待测物质不能降低权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录水平,则所述待测物质为非候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;
e)鉴定所述待检测物质是否使权利要求1所述蛋白质失活,如所述待测物质能使权利要求1所述蛋白质失活,则所述待测物质为候选的辣椒疫霉菌杀菌剂;如所述待测物质不能使权利要求1所述蛋白质失活,则所述待测物质为非候选的辣椒疫霉菌杀菌剂。
9.具有如下1)-5)中至少一种功能的物质在制备辣椒疫霉菌杀菌剂中的应用:
1)抑制权利要求1所述蛋白质的表达;
2)抑制权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录;
3)降低权利要求1所述蛋白质的表达水平;
4)降低权利要求1所述蛋白质的编码基因的转录水平;
5)使权利要求1所述蛋白质失活。
10.扩增权利要求2或3所述的核酸分子的全长或其任意片段的引物对。
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