[发明专利]具有抗氧化活性的糖基化乳清蛋白多肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种制备具有抗氧化活性的糖基化乳清蛋白多肽的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将乳清蛋白溶液进行热处理；

(2)热处理后的乳清蛋白溶液降温后加入碱性蛋白酶进行水解反应；

(3)水解反应产物经灭酶后，加入糖，加热，进行糖基化反应；

(4)冷却，离心取上清液，浓缩，冷冻干燥，即得。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的乳清蛋白溶液的浓度为2-10％(w/w)，优选为5％(w/w)；所述的热处理为：将乳清蛋白溶液在90-98℃温度下处理3-8分钟；优选的，将乳清蛋白溶液在95℃温度下处理5分钟，然后冷却。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所加入的碱性蛋白酶的体积与乳清蛋白底物的重量比为(1～3)∶100，即每100g的乳清蛋白底物所需要的碱性蛋白酶的体积为1-3ml，优选为2ml。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的水解反应在以下条件下进行：水解反应温度为50-60℃，pH值为8.0-9.0，水解反应时间为4-6小时；优选的，在以下条件进行水解反应：水解反应温度为65℃，pH值为8.5，水解反应时间为5小时。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的糖基化反应在以下条件下进行：pH值8.0～9.0，水解得到的多肽混合液加入糖，使加入的糖的终浓度为6～10％(w/w)，在50～90℃温度下搅拌加热3～5小时，其中，所述的糖为葡萄糖。

6.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中所述的离心步骤所采用的离心力为1000～1200×g，离心的时间为10～15min。

7.按照权利要求1所述的方法，其特征在于还包括在糖基化反应结束后，将糖基化的产物进一步进行分离，得到分子量在800-5000Da之间的多肽混合物。

8.按照权利要求7所述的方法，其特征在于：所述的将糖基化的产物进一步进行分离，采用的是超滤的方法，优选采用中空纤维膜进行，膜孔径分别为800Da、5000Da，超滤的温度为20℃，压力为0.1MPa。

9.由权利要求1-8任一项所述的方法所制备得到的糖基化乳清蛋白多肽，优选的，所述的糖基化乳清蛋白多肽主要由分子量在800-5000Da之间的混合糖基化乳清蛋白多肽组成。

10.权利要求9所述的糖基化乳清蛋白多肽在制备抗氧化剂中的应用。