[发明专利]腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗及其应用无效
| 申请号： | 201210073529.7 | 申请日： | 2012-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN102600481A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 仇华吉;孙元 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | A61K48/00 | 分类号： | A61K48/00;A61K39/12;A61K39/187;A61K39/145;A61P31/14;A61P31/20;C12N15/861;C12N7/01 |
| 代理公司： | 北京市德权律师事务所 11302 | 代理人： | 余光军 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 病毒 日本 脑炎 复制子 嵌合 载体 猪瘟 疫苗 及其 应用 | ||
1.一种腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗,其特征在于，包括：复制缺陷性人5型腺病毒、日本脑炎病毒复制子和待表达的抗原基因。
2.按照权利要求1所述的腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗，其特征在于：在日本脑炎病毒复制子SpeI位点前插入质粒pCI的内含子序列；所述质粒pCI的内含子序列的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。
3.按照权利要求1所述的腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗，其特征在于：待表达的抗原基因位于JEV复制子载体的SpeI和SalI位点之间。
4.按照权利要求1-3任何一项所述的腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗，其特征在于：所述的待表达的抗原基因是猪瘟病毒E2基因、猪蓝耳病病毒GP5基因、猪圆环病毒2型Cap基因或猪流感病毒HA基因。
5. 权利要求1-3任何一项所述的腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗在制备动物疫苗中的用途。
6.一种构建1-3任何一项所述腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗的方法，包括以下步骤：
（1）将日本脑炎病毒复制子插入到腺病毒穿梭载体中；（2）将来自pCI载体的嵌合内含子以及待表达的抗原基因插入到日本脑炎病毒复制子中，得到重组转移载体；（3）将转移载体线性化后转化含有腺病毒骨架载体的感受态细胞，得到重组腺粒；（4）将重组腺粒线性化后转染细胞，传代直至出现细胞病变，得到含有表达抗原基因的腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体疫苗。
7.按照权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的腺病毒穿梭载体包括pShuttle、pShuttle-CMV、pAdTrack或pAdTrack-CMV；优选为pShuttle-CMV。
8.按照权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（2）中在日本脑炎病毒复制子SpeI位点前插入质粒pCI的内含子序列；待表达的抗原基因插入到JEV复制子载体的SpeI和SalI位点之间。
9.腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗，其微生物保藏号是：CGMCC.5825。
10.权利要求9所述的腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗在制备预防日本脑炎病毒或/和猪瘟病毒的疫苗中的用途。
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