[发明专利]一种利用RNA恒温扩增的沙门氏菌(Sal.spp.)核酸检测试剂盒有效
申请号: | 201210058670.X | 申请日: | 2012-03-06 |
公开(公告)号: | CN103305593A | 公开(公告)日: | 2013-09-18 |
发明(设计)人: | 张长明;于明辉;方亮;居金良 | 申请(专利权)人: | 上海仁度生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/42 |
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地址: | 201201 上海市张江*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 rna 恒温 扩增 沙门氏菌 sal spp 核酸 检测 试剂盒 | ||
1.一种利用RNA恒温扩增的沙门氏菌(Sal.spp.)核酸检测试剂盒,试剂盒包括:(1)分别装有裂解液、核酸提取液、洗涤液、Sal.spp.反应液、Sal.spp.检测液、SAT酶液、Sal.spp.内标、Sal.spp.阳性对照、Sal.spp.阴性对照并加盖密封的多个试剂瓶或管,和(2)分隔并集中包装这些试剂瓶或者管的包装盒,其中所述的核酸提取液包含磁珠、捕获探针(TCO),其特征在于捕获探针(TCO)序列为:
5’-GCCAGCTGGTATCTTCGACTGACTTCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-3’。
2.根据权利要求1的试剂盒,所述的Sal.spp.检测液包含上游引物、5’端带有T7启动子序列的下游引物、两端分别共价标记有荧光染料和淬灭剂的单链核酸探针,其特征还在于Sal.spp.检测液中上游引物序列为:5’-GGGAGAAGGCACGCTGAC-3’,下游引物的序列为:
5’-AATTTAATACGACTCACTATAGGGAGACAGCCAGCTGGTATCTTCGACTGACTTCAG-3’。
3.根据权利要求1的试剂盒,其特征还在于所述的Sal.spp.检测液中用于检测靶核酸的单链核酸探针序列为:5’-CCGAGAAGUGAUUUACUCGG-3’,其中5’端为FAM标记,3’端为DABCYL标记,用于检测内标的单链核酸探针序列为:5’-CGCUGGAGCGUGGUGAGCAGCG-3’,其中5’端为HEX标记,3’端为DABCYL标记。
4.根据权利要求1的试剂盒,其特征还在于所述的Sal.spp.内标序列为:
5’-UCAGGUAACACGAAAUCGUACCCCAAACCGACACAGGUGGUCAGGUAGAGAAUACCAAGGCGCUUGAGAGAACUCGGGUGAAGGAACUAGGCAAAAUGGUGCCGUAACUUCGGGAGAAGGCACGCUGACACGUAGGUUGGAGCGUGGUGAGCUGGAGCUGAAGUCAGUCGAAGAUACCAGCUGGCUGCAACUGUUUAUUAAAAACACAGCACUGUGCAAACACGAAAGUGGACGUAUACGGUGUGACGCCUGCCCGGUGCCGGAAGGUUAAUUGAUGGGGUCAGCGUAAGCGAAGCUCCUGAUCGAAGCCCCGGUAAACGGCGGCCGUAACUAUAACGGUCCUAAGGU-3’。
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